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目的：探讨IL-17对MBP鼻粘膜免疫耐受治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的影响及其相关机制。
方法：1、分别向PBS组、MBP 120μg/d组、MBP 120μg+IL-17 0.01μg/d组、MBP 120μg+IL-17 0.05μg/d组、MBP 120μg+IL-17 0.1μg/d组和MBP120μg+IL-17 0.1μg/d而不免疫组大鼠。免疫之前,鼻粘膜分别给药,连续5天,诱导其发生免疫耐受。在免疫耐受的基础上建立EAE动物模型。观察各组大鼠临床症状,评估EAE临床发病情况；在免疫后第15天处死大鼠,每组8只,分别取血、淋巴结、脊髓：淋巴细胞增殖实验检测淋巴细胞对特异性MBP多肽的增殖活性；取脊髓切片HE染色观察淋巴细胞浸润及分布情况；采用ELISA方法检测血清中IFN-γ和IL-4、IL-17、IL-6、TGF-β等细胞因子水平；2、分别向PBS组(鼻粘膜给予PBS)、MBP组(鼻粘膜给予MBP120μg/d)、IL-17 0.1μg/d组(鼻粘膜给予MBP 120μg+IL-17 0.1μg/d)、Anti-IL-6组(鼻粘膜给予MBP 120μg+IL-17 0.1μg/d,腹腔注射Anti-IL-6)、和IgG同型对照组(鼻粘膜给予MBP 120μg+IL-17 0.1μg/d,腹腔注射Rabitt IgG)大鼠鼻粘膜给药,连续5天,诱导其发生免疫耐受。在免疫耐受的基础上建立EAE动物模型。观察各组大鼠临床症状,评估EAE临床发病情况；在免疫后第15天处死大鼠,每组8只,分别取淋巴结、脊髓：淋巴细胞增殖实验检测淋巴细胞对特异性MBP多肽的增殖活性；取脊髓切片HE染色观察淋巴细胞浸润及分布情况；免疫组化检测脊髓切片中IL-17+细胞表达情况；流式细胞仪检测T细胞亚群变化。3、取MBP组大鼠淋巴细胞体外培养,分别给予MBP、MBP+IL-17、MBP+IL-17+Anti-IL-6刺激72h后,过继免疫Lewis大鼠,评估大鼠临床发病情况、淋巴细胞浸润及流式细胞仪检测T细胞亚群变化。
结果：1、与MBP组相比,IL-17 0.1μg/d组大鼠免疫后出现进食减少、体重减轻、尾瘫、后肢瘫痪等临床症状；淋巴细胞增殖明显,差异显著(P<0.01);淋巴细胞浸润面积较大且细胞数量较多；与MBP组细胞因子含量相比,IL-170.1μg/d组中IL-4.表达明显降低(P<0.05);IFN-γ表达显著增高(P<0.01);IL-6表达显著增高(P<0.01);IL-17表达显著增高(.P<0.001)以及TGF-β表达显著降低(P<0.01);与PBS组相比,无显著性差异。IL-17 0.01μg/d组、IL-17 0.051μg/d组与IL-17 0.1μg/d组相比,大鼠无临床症状或症状较轻；淋巴细胞增殖反应性显著降低；淋巴细胞浸润面积较小且细胞数量较少；与MBP组相比,无明显差异。2、Anti-IL-6组与IL-17 0.1μg/d组、PBS组、IgG同型对照组相比,大鼠临床症状较轻或无临床症状：淋巴细胞增殖反应性显著降低(P<0.01);脊髓切片中,淋巴细胞浸润面积较小且细胞数量较少、IL-17+细胞数显著减少(P<0.01);CD4+Foxp3+T细胞百分率明显高于IL-17 0.1μg/d组(P<0.05)、CD4+IL-17+T细胞百分率显著低于IL-17 0.1μg/d组(P<0.01),与MBP组相比无显著差异。3、在AT-EAE中,MBP+IL-17组大鼠分别与MBP组、MBP+IL-17+Anti-IL-6相比,MBP+IL-17组大鼠临床症状加重；淋巴细胞浸润面积较大且细胞数量较多；CD4+IL-17+T细胞百分率显著增高(P<0.01)、CD4+Foxp3+T细胞百分率显著降低(P<0.01)。
结论：1.经鼻粘膜给予MBP68-86,可以诱导EAE免疫耐受的形成,预防EAE的发生；2.鼻粘膜给予IL-17可以打破MBP特异性免疫耐受的形成；3、IL-17在打破MBP鼻粘膜免疫耐受治疗EAE中存在剂量依赖性；4.IL-17打破免疫耐受是通过促进IL-6表达增加,从而导致初始T细胞向Th17细胞分化增多,向Treg细胞分化减少,打破Treg/Th17之间的平衡,导致EAE的发生。5.IL-17/Th17在EAE的发病过程中及在鼻粘膜免疫耐受治疗EAE中起重要作用。