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衰老是先天(遗传)因素和后天(环境)因素共同作用的结果。羰基毒化衰老学说认为在氧自由基引起的脂质过氧化和非酶糖基化反应中生成的具有反应活性的共同中间产物——不饱和醛酮能与生物体内的生物大分子发生羰-氨交联反应,这正是缓慢老化的本质。本文讨论了衰老的自由基学说、非酶糖基化学说以及在其基础上根据老年色素的形成机制发展而成的羰基毒化衰老学说。在羰基应激与运动损伤具有相关性的研究背景下,探讨了运动常见补充剂——赖氨酸(lysine)的直接清理丙二醛(MDA)的运动保护机理。同时研究了赖氨酸保护动物模型对细胞凋亡的影响。
本学位论文研究工作总结如下:
一、从整体动物水平上研究赖氨酸直接清理MDA的能力以探讨赖氨酸可能具有潜在的去羰基毒化的作用。将32只SD大鼠随机分成四组(n=8),实验前一个小时给相应的药物。三个运动力竭组分别用生理盐水,赖氨酸和MDA灌胃,剂量均为0.1 mL/10g(以体重计算);安静组用相同剂量的生理盐水灌胃。实验之后立刻处死所有大鼠,眼球取血法取血制备血清,再分别测定MDA、乳酸和赖氨酸的浓度并进行分析。结果表明赖氨酸能在一定程度上清除力竭运动大鼠血清中产生的大量MDA。
二、研究赖氨酸与丙二醛直接反应产物的紫外吸收光谱。首先分析赖氨酸、MDA、力竭大鼠的尿液、赖氨酸与MDA直接反应产物的紫外吸收光谱图,其次分析MDA与不同浓度赖氨酸直接反应产物的紫外吸收光谱图,最后分析赖氨酸与不同浓度MDA直接反应产物的紫外吸收光谱图。同时还研究了不同pH值对赖氨酸与MDA直接反应体系的影响。结果表明赖氨酸与MDA的直接反应产物在400nm处产生了新的紫外吸收峰,这种物质的紫外吸收峰与尿液中某种物质的紫外吸收峰十分接近。同时赖氨酸清除丙二醛的速率受到浓度和酸度的影响。
三、研究赖氨酸保护动物模型对肝细胞凋亡的影响。用TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒进行肝凋亡细胞分析。结果表明赖氨酸对力竭运动大鼠有保护作用,可以为运动训练提供营养。