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目的:本课题通过检测成年SD大鼠进食不同热量水平饲料及加入姜黄饲料后,肠道超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平的变化,旨在探讨不同热量水平饮食对肠道氧化、抗氧化活性的影响,同时探明天然抗氧化剂姜黄素对高热量饮食所致肠道氧化损伤是否具有保护作用,以寻求最佳的饮食方案及抗氧化食品,来消除过度的氧化活性,维持体内正常的抗氧化水平,维护机体重要脏器功能,预防与自由基损伤有关的退行性疾病的发生。
方法:将清洁级健康雄性成年SD大鼠46只随机分为4组。Ⅰ组:普通饲料组(即对照组),共12只,给予基础饲料喂养(总热能13.77kJ/g);Ⅱ组:高热量饲料组,共12只,给予高热量饲料喂养(总热能19.33kJ/g);Ⅲ组:低热量饲料组(热量摄入为Ⅰ组的60%),共12只,给予低热量饲料喂养(总热能8.262kJ/g);Ⅳ组:高热量+姜黄饲料组,共10只,给予加入一定量姜黄的高热量饲料喂养(高热量饲料100g含有姜黄20g)。每组均保持主要营养成分一致。各组SD大鼠均自由饮水,喂养90天后,经股动脉放血处死取大鼠肠道组织标本制作组织匀浆及免疫组织化学染色切片。采用分光光度计法检测肠道组织匀浆的MDA含量、SOD活力及iNOS含量,免疫组织化学法检测肠道iNOS蛋白活性的表达。采用SPSS11.5软件包建立数据库,并进行统计分析。所有计量资料数均以(x±S)表示,所有资料均先进行正态性检验;多组间均数进行方差齐性检验和单因素方差分析;两组间比较采用两样本均数比较的t检验,P<0.05,则认为差异有统计学意义。
结果:①饲养前各组大鼠体重满足方差齐性,各组间体重无显著性差异(P>0.05);1个月末,与普通饲料组(即对照组)比较,高热量饲料组体重明显增加,低热量饲料组、高热量+姜黄饲料组体重增长缓慢,差异均具有显著性(P<0.05);2个月末,与普通饲料组比较,高热量饲料组体重增加,但无显著差异(P>0.05),低热量饲料组、高热量+姜黄饲料组体重增长缓慢,差异均具有显著性(P<0.05);3个月末,与普通饲料组比较,高热量饲料组体重增加,但无显著差异(P>0.05),低热量饲料组、高热量+姜黄饲料组体重增长缓慢,差异均有显著性(P<0.05)。②与普通饲料组(即对照组)相比,低热量饲料组、高热量+姜黄饲料组大鼠肠道组织SOD活力明显升高,MDA含量降低,其差异均有统计学意义(P<0.05),但低热量饲料组与高热量+姜黄饲料组两组之间肠道组织SOD活力及MDA含量差异无统计学意义(P>0.05);与普通饲料组相比,高热量饲料组SOD活力稍有下降,MDA含量升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。③与普通饲料组(即对照组)相比,高热量饲料组肠道组织iNOS含量升高,其差异有统计学意义(P<0.05);高热量+姜黄饲料组肠道组织iNOS含量稍有升高,而低热量饲料组肠道组织iNOS含量降低,但差异均无统计学意义(P>0.05)。与高热量+姜黄饲料组相比,高热量饲料组大鼠肠道组织iNOS含量显著升高(P<0.05);低热量饲料组与高热量+姜黄饲料组两组之间肠道组织iNOS含量差异无统计学意义(P>0.05)。④免疫组织化学检测结果显示,普通饲料组、低热量饲料组及高热量+姜黄饲料组肠道iNOS蛋白略有表达,高热量饲料组肠道iNOS蛋白表达明显升高。
结论:本实验主要是从不同热量的摄入及饮食添加成分两方面对肠道MDA,SOD,iNOS指标的影响进行研究的。肠道在维持机体的正常生命活动中起着重要的作用,被称为应激反应的中心器官。实验结果提示热量限制可能是一种健康的饮食方式,可以显著提高肠道抗氧化酶SOD的活性,能够减少自由基生成,从而降低其对肠道的损伤。天然抗氧化食品姜黄中的主要成分姜黄素具有多方面的药理作用,实验表明其可以通过提高肠道SOD的活性来发挥其抗氧化作用,能够降低高热量饮食对机体产生的氧化损害,与热量限制饮食具有异曲同工之妙。实验的结果显示,热量限制、合理的饮食结构及某些天然抗氧化剂的摄入对机体具有重要的保护作用。是否可以用于指导人们更加合理的饮食,以获得和保持最佳的健康状态,预防由于自由基水平升高而诱发的某些疾病,尚待进一步深入研究。