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背景:胃间质瘤是是一组起源于中胚层卡哈尔间质细胞(interstitial cells of cajal,ICC)及前体细胞且由未分化或多潜能的梭形或上皮样细胞组成的消化道间叶源性肿瘤,约占胃肠道间质瘤的60-70%,占胃肿瘤的2%,它具有非定向分化和潜在恶性倾向,预后主要依赖于早期发现和及时治疗。目前胃间质瘤术前的诊断仍主要依靠胃镜、超声胃镜及CT检查,术前不适当的活检可能会引起肿瘤破溃、出血和增加肿瘤播散的危险性,故术前不推荐常规活检或穿刺,最终诊断要依靠术后病理学检查,并结合免疫组化染色,部分诊断困难的病例,需要检测有无c-kit或PDGFRA基因的突变。在前期的研究中,本组的研究人员已经利用基因芯片技术筛选出胃间质瘤中主要的差异表达基因。按照差异基因筛选标准q-value≤5%且Fold Change≥2.0或≤0.5,6对标本共同差异表达3 293个,其中上调2 588个,下调705个。目的:验证ETV1、DKK4在胃固有肌层间质瘤及瘤旁正常组织中的表达,并分析其与胃固有肌层间质瘤临床病理参数间的关系。方法:选取2016年7月至2017年7月1年间烟台毓璜顶医院经内镜治疗的12例胃固有肌层间质瘤组织及瘤周组织标本,应用基因芯片技术筛选出其中的主要差异表达基因,并选取其中的ETV1、DKK4两个个基因,应用反转录及QPCR技术:现有的普遍应用的分析实时定量PCR实验数据的方法,分为两种,一种是绝对定量,另一种就是相对定量。绝对定量,是利用标准的曲线来进行计算初始模板的拷贝数;相对定量方法,则是通过比较两类样本,一个是经过处理的样品,另一个是没有经过处理的样品或内参的样品目标转录本,这两者之间的表达差异。基线的定义:在PCR扩增反应中,最初的数个循环里,荧光的信号转变不大,接近于一条直线,这样的直线就称之为基线。荧光阈值的定义:是在荧光的扩增的曲线的基础上,人为的去设定的一个值,这个阈值可以设定为在荧光信号指数扩增的阶段上的任何一个位置上。但在通常的荧光的阈值的设置上,一般在3至15个循环以内。CT值:每个反应管内,荧光的信号达到设定的阈值时所经历的循环数。各个模板的CT值与该模板的起始的拷贝数的对数存在线性关系,初始拷贝数越多,CT值越小,反之也是如此。利用已经知道的初始的拷贝数的标准品,即可得出标准的曲线,其中纵坐标代表的意义是CT值,横坐标代表的意义是初始拷贝数的对数。因此想要计算出标准曲线上该样本的初始拷贝数,就只需要得到未知的样本的CT值。实时定量PCR实验中分析基因表达相对变化的众多方法中的一种简便方法,即相对定量的一种简便方法进行验证。结果:12例胃固有肌层间质瘤患者,ETV1、DKK4在瘤组织中特异性表达而在瘤周组织中不表达。实验结论:ETV1、DKK4在胃间质瘤的发病中特异性表达,有望以后的胃间质瘤患者可行基因检测,对胃间质瘤的靶向治疗提供新的靶点。