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大豆是我国重要的粮食和经济作物之一，但由于我国大豆生产规模小、效益低、大豆品质参差不齐，与美国转基因大豆相比处于绝对劣势，大量的优质价廉的进口大豆冲击着国内市场，导致国内大豆生产的萎缩。本论文以大豆CBF1基因为目的基因进行了大豆遗传转化的研究。首先分别以大豆子叶节和幼叶为外植体，建立高频再生体系;以此体系为培养基础对农杆菌介导的遗传转化条件进行了研究，并获得了转基因抗性愈伤组织。结果如下:
1.为建立大豆子叶节高频再生体系，以“小粒黄”大豆子叶节为外植体，研究了萌发天数、6-BA及TDZ浓度对大豆子叶节丛生芽诱导的影响。结果表明:随着萌发天数的增加丛生芽诱导率下降，萌发7天的子叶节外植体对丛生芽诱导率最高，达到82.6％。在附加不同浓度6-BA和TDZ的1/2MSB5基本培养基上均能诱导出丛生芽，但丛生芽诱导率也不同，以1.5mg·L-16-BA和0.2mg·L-1TDZ配比时，丛生芽诱导率最高，达到85.7％。添加AgNO3的培养基对不定芽的诱导有显著的作用，当AgNO3的浓度为3mg·L-1时，大豆的诱导率最高，达到66.7％,但是当AgNO3的浓度达到5mg·L-1不定芽诱导率明显降低。
2.以大豆幼叶为外植体，对愈伤组织的诱导条件进行了研究。本研究摸索出了一个高效的愈伤组织诱导方法，大豆幼叶培养基1/2MSB5+1mg·L-1NAA+6mg·L-1BAP+3％蔗糖+0.8％琼脂上可高频率诱导出愈伤组织，为今后大豆基因转移和植株再生奠定了良好的基础。小粒黄幼叶诱导的愈伤组织在10天左右进行继代，可以保持愈伤组织的新鲜，提高愈伤组织的分化能力。同时，不同品种的成愈能力差异很大，品种之间的差异是大豆外植体诱导愈伤组织的关键因素
3.本文还对农杆菌介导的愈伤组织转化体系进行了的研究，初步确定了以大豆幼叶作为外植体的农杆菌介导的遗传转化条件:叶片预培养时间为3d，用农杆菌菌液侵染15min，然后在培养基上铺一层灭菌滤纸共培养3d后清洗，Hyg选择压为10mg·L-1，抑菌浓度为Car250mg·L-1。筛选培养后获得具有潮霉素抗性的愈伤组织，对共培养后的大豆愈伤组织进行了GUS瞬时表达检测，采用PCR方法和GUS组织化学方法对抗性植株进行了鉴定，初步证实外源CBF1基因已存在于大豆幼叶愈伤组织的基因组中。