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目的:目前随着非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)在我国发病率逐渐升高,尤其是美国等西方国家,成为慢性肝病最常见的原因,在中国上海、广州、香港等发达地区的患病率也呈上升趋势。非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)作为该疾病谱中的关键阶段,能够通过无创性手段在早期诊断出NASH是非常必要的。近年来随着代谢组学的发展,利用代谢组学及其研究平台对NASH的代谢轮廓进行分析成为热点,本研究基于此,运用串联质谱技术,研究代谢组学在NASH与非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver,NAFL)血液中的差异,寻找可用于早期诊断的潜在代谢标志物。方法:收集NASH及NAFL患者各30例,运用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技术,对采集的干血滤纸片样品进行检测,通过主成分分析法(PCA)及正交偏最小二成分析法(OPLS)对获取的代谢数据进行多维统计分析,并构建PCA及OPLS-DA模型。利用OPLS-DA模型所得的变量投影重要性值(variable importance in the projection,VIP)的大小,初步筛选代谢物,结合独立样本t检验及Mann-Whitney U检验进一步筛选潜在代谢标志物,同时通过非参数检验分析血代谢组学的变化。将筛选的代谢物使用二元Logistic回归后行ROC分析,计算曲线下面积(AUC)评估它们对NASH诊断的价值。结果:NASH组和NAFL组血液代谢物比较有统计学差异,两组之间共计有30种代谢物有统计学差异,p<0.05。可见丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸、谷氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、羟丁酰基肉碱、甲硫氨酸/苯丙氨酸、鸟氨酸/瓜氨酸、丙酰基肉碱/乙酰基肉碱、异戊酰基肉碱/乙酰基肉碱、羟异戊酰基肉碱/辛酰基肉碱、羟异戊酰基肉碱/游离肉碱、辛酰基肉碱/葵酰基肉碱水平在NASH患者中升高,而戊二酰基肉碱、肉豆蔻二酰基肉碱、肉豆蔻烯酰基肉碱、精氨酸/鸟氨酸、甲硫氨酸/亮氨酸、苯丙氨酸/络氨酸、乙酰基肉碱/游离肉碱、戊二酰基肉碱/羟异戊酰基肉碱、戊二酰基肉碱/棕榈酰基肉碱、肉豆蔻烯酰基肉碱/棕榈酰基肉碱、丙二酰基肉碱、己二酰基肉碱、戊二酰基肉碱/辛酰基肉碱在NASH组下降。患者血中总共检测了58种代谢物,进行多维统计分析,构建PCA(R~2X=0.468,Q~2=0.196)及OPLS-DA模型(R~2X=0.653,R~2Y=0.74,Q~2=0.454),根据VIP>1.5值选出了6种在NAFL组与NASH组见有显著差异特征代谢物,结合独立样本t检验及Mann-Whitney U检验,最终筛选出Leu、Ala、Asp、Glu、Orn这5种差异代谢物,并且其AUC均大于0.6,联合诊断后AUC达0.932,灵敏度为83.3%,特异度为93.3%。结论:1、运用液相色谱-串联质谱技术,检测NAFL组及NASH组各30例患者的血标本,进行t检验或非参数检验,发现氨基酸、酰基肉碱的代谢状况在两组之间存在差异。2、通过构建OPLS-DA模型,初步选出了6个对比NAFL组差异显著的代谢物质,进行t检验或非参数检验,最终选出Leu、Ala、Asp、Glu、Orn5种潜在代谢标志物,其联合诊断的AUC为0.932,具有良好诊断价值。