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目的：肺癌是常发生的恶性肿瘤，近几年来发病率和死亡率逐年上升，导致肺癌已经成为恶性疾病中的主要死因。由于肺癌早期症状不典型，容易发生转移，很多患者发现肺癌时已经是晚期，无法手术切除，只能通过放疗、化疗等综合方法来治疗，然而治疗效果不欠。侵袭和转移已经是肺癌患者致死的主要原因之一。国内外研究表明，EGFR通常在恶性上皮肿瘤细胞中过度表达，而且表达水平与与肿瘤的预后明显相关，高表达预示预后不良。EGFR为表皮生长因子受体家族成员之一，胞内区含有酪氨酸激酶段和配体结合位点，酪氨酸激酶活性对调节细胞增殖及分化至关重要。配体与EGFR结合后通过一系列信号转导级联反应最终引起核内基因转录水平的增加，使细胞增殖、转化和恶性。另外，国内外许多研究发现EGFR和COX-2在肺癌的发生、发展存在一定的协同关系。癌基因C-erbB-2编码的蛋白产物也是一种跨膜蛋白受体，与EGFR同为表皮生长因子受体家族的成员,在很多常见的肿瘤中表达。由于C-erbB-2编码的蛋白结构与EGFR高度同源，所以C-erbB-2蛋白并不是单独在肺癌转移中发挥作用，研究发现C-erbB-2蛋白常常与表皮生长因子受体家族其他成员形成异源二聚体促使细胞生长转化的激活机制，从而促进肺癌的转移。CXCR4是趋化因子受体的一种，CXCR4与其配体SDF-1结合后相互作用在肺癌的侵袭转移上发挥着重要作用。许多研究表明肿瘤转移和炎症细胞浸润有着相似的形成过程，如均涉及到细胞滚动、黏附和跨内皮迁移等。基质。CXCR4／SDF-1的相互作用使得肿瘤细胞易于从原发部位脱落，侵袭人细胞外基质和血管，发生远处转移。β-连环素（β-catenin）是一种主要存在与细胞浆的多功能蛋白，可介导细胞间的粘附和参与细胞增殖、分化和凋亡。研究表明β-catenin的异常表达可导致细胞信号传导途径的激活，进而启动细胞核内的基因转录，使细胞增殖恶化，提高癌细胞转移能力,从而促进肿瘤转移的发生。尼美舒利(nimesulide)是一种环氧化酶-2的选择性抑制药物，研究表明，尼美舒利对于肿瘤的生长有一定的预防作用，对于肿瘤的转移也有一定的抑制作用，并且可以增强放化疗的效果。奥沙利铂(oxaliplatin)作为第三代的广谱铂类抗癌药物，可以与DNA形成烷化结合物，使DNA形成相互交联，进而抑制DNA的复制。本实验通过免疫组织化学染色法和荧光实时定量PCR法测定EGFR，C-erbB-2，CXCR4，β-catenin在瘤组织中的表达水平来探讨尼美舒利和奥沙利铂对其表达的影响，进而研究肿瘤转移的机制。方法:选取4-5周龄的BALB/c-nu裸鼠25只，雄性，体重范围为20g到24g之间，用无菌裸鼠饲料和灭菌的纯净水在独立通风笼（IVC）环境中喂养，环境的湿度、温度适宜裸鼠生活，喂养环境中没有可以致病的病原菌。用300ul链霉素、12%胎牛血清、150ul青霉素配置而成的F12k培养基，在温度为37℃的条件下含CO2为5%的培养箱中进行培养，细胞呈贴壁生长。当细胞生长至融合为70%-80%时，用浓度为0.25%的胰蛋白酶进行消化，传代。选取细胞分裂旺盛的A549细胞，用配制的PBS进行洗涤，用浓度0.25%的胰酶液消化，制作成单细胞悬浮液，收集于离心管，以离心机1000rpm平衡离心5分钟，弃去上清液。用不含胎牛血清的F12k培养基稀释，用血细胞计数板计数，使得细胞密度为1×107/ml，进行细胞接种。消毒裸鼠皮肤后在右侧腋下用1ml注射器注射0.2ml上述细胞悬液，建立人工肺癌模型。当移植瘤生长到直径4mm时，去除肿瘤体积最小的1只裸鼠，将剩下的24只裸鼠随机分为4组，每组6只，分别命名为对照组、奥沙利铂组、尼美舒利组、尼美舒利和奥沙利铂联合组。尼美舒利组采用灌胃给药,剂量为2.5mg/kg,每天给药1次；奥沙利铂组采用腹腔注射给药,剂量为10mg/kg/次,每周给药2次。对照组腹腔注射等量生理盐水,口服灭菌蒸馏水。给予相应药物42天后处死全部裸鼠，手术剥离移植瘤组织，免疫组织化学染色检测EGFR、C-erbB2、CXCR4和β-catenin的蛋白的表达和荧光实时定量PCR法检测肿瘤组织中EGFR、C-erbB2、CXCR4和β-catenin的mRNA表达。结果:用病理图文分析管理系统对EGFR、C-erbB-2、CXCR4、β-catenin蛋白免组切片进行积分光密度值分析。统计分析结果显示，与对照组相比，尼美舒利组和联合用药组EGFR、C-erbB2、CXCR4和β-catenin蛋白表达水平均降低(分别P <0.05)；与对照组相比，奥沙利铂组C-erbB2、CXCR4表达水平变化不大(分别P>0.05)，而EGFR、β-catenin蛋白表达水平降低(P <0.05)；与尼美舒利组相比，联合用药组EGFR、C-erbB2、CXCR4和β-catenin蛋白表达水平均降低(分别P <0.05)。荧光实时定量PCR法测定EGFR、C-erbB2、CXCR4、β-catenin mRNA表达，统计分析结果显示，与对照组相比，尼美舒利组和联合用药组EGFR、C-erbB2、CXCR4、β-catenin mRNA表达水平均降低(分别P <0.05)；与对照组相比，奥沙利铂组EGFR、β-catenin mRNA表达水平降低(P <0.05)，而C-erbB2、CXCR4mRNA表达水平变化不大(分别P>0.05)；与尼美舒利组相比，联合用药组EGFR、C-erbB2、CXCR4、β-cateninmRNA表达水平均降低(分别P <0.05)。结论：尼美舒利单一应用或者联合奥沙利铂应用均能抑制人肺癌裸鼠移植瘤EGFR、C-erbB2、CXCR4、β-catenin的表达。奥沙利铂能抑制EGFR、β-catenin的表达。尼美舒利与奥沙利铂联合应用提高了奥沙利铂的抗肿瘤作用。