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目的:大肠癌的发病率逐年上升,严重威胁着人们的健康。当前治疗癌肿的常规方法难于继续提高患者的生存率和生活质量。在探寻其它治疗措施中,中医药治疗逐渐受到重视。康莱特注射液(KLT)是从中药苡仁中提取的脂肪乳。已有研究表明康莱特对多种恶性肿瘤有明显的治疗效果。本研究是为了探讨康莱特对大肠癌细胞体外生长的直接抑制作用,并试图阐明其机制。
方法:用HT-29细胞株作为靶细胞。将其常规培养于37℃、5%CO2培养箱中,贴壁生长,待细胞进入对数生长期后开始实验。所有的实验项目都分为KLT药物组、乳剂对照组与空白对照组。用MTT法来检测康莱特对HT-29细胞体外生长的抑制率。碘化丙啶(PI)染色后用流式细胞仪检测细胞周期分布。用荧光染色法(吖啶橙/溴化乙啶)测定HT-29细胞的凋亡指数。用TRAP-ELISA法检测HT-29细胞的端粒酶活性。
结果:1镜下观察和MTT法的结果均显示康莱特对HT-29细胞体外生长有明显抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,抑制率最大达48.0%。乳剂对HT-29细胞生长有轻微抑制作用,抑制率最大仅4.1%。KLT药物组与乳剂对照组的同浓度组之间有统计学差异(P<0.05)。2KLT药物组HT-29细胞的G1期百分比和S期百分比都明显低于各对照组(P<0.01),最大均约低1/2;而G2+M期百分比明显高于各对照组(P<0.01),最大约高出5倍多。都呈剂量依赖性。3各组的HT-29细胞凋亡指数无统计学差异(P>0.05)。4KLT药物组的HT-29细胞端粒酶活性低于空白对照组(P<0.05),最大低10.1%,并呈时间和剂量依赖性。
结论:康莱特能明显抑制HT-29细胞体外生长,诱导细胞凋亡的作用不明显,但能阻滞细胞周期的G2+M时相。后者可能是康莱特抑制HT-29细胞增殖的原因。另外,康莱特对HT-29细胞端粒酶活性有一定抑制作用,其机制及意义尚需进一步探讨。