【摘 要】
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应用细胞色素C还原法测定了处于对数生长期的人肝癌细胞SMMC-7721、人宫颈癌细胞HeLa、小鼠黑色素瘤细胞B-16和仓鼠肺成纤维细胞V-79自分泌O的浓度.相差显微活体观察结果显示
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应用细胞色素C还原法测定了处于对数生长期的人肝癌细胞SMMC-7721、人宫颈癌细胞HeLa、小鼠黑色素瘤细胞B-16和仓鼠肺成纤维细胞V-79自分泌O<,2->的浓度.相差显微活体观察结果显示,O<,2->清除剂处理后,四种培养细胞的密度均较对照组减小,大多数细胞变圆,体积缩小;细胞核固缩并有"微核"出现;荧光显微观察和电子显微图象显示,O<,2->清除剂作用于肝癌细胞后,细胞呈现凋亡各阶段的形态特征:细胞皱缩、细胞膜泡化、细胞核固缩、染色质凝集在细胞核边缘.流式细胞术分析结构表明:NBT使肝癌细胞DNA含量减小的同时,细胞DNA的酸变性敏感性增加、细胞总蛋白的含量同时降低.单细胞DNA凝胶电泳和DNA琼脂糖凝胶电泳分析表明,超氧阴离子清除剂NBT诱导肝癌细胞凋亡时,DNA断裂成500bp和300bp的片段.在低浓度超氧阴离子清除剂NBT(5μmol/L)作用下,有些肝癌细胞显示与原来细胞完全不同的形态特点.流式细胞术分析表明,NBT(5μmol/L)使肝癌细胞表面ConA受体位点数明显较少,这2项指标提示,低浓度NBT作用下,有些肝癌细胞发生了再分化.综上结果,超氧阴离子清除剂具有抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡和再分化的作用.这表明超氧阴离子在细胞增殖、分化和凋亡的调控中起信号传导作用.该结果为肿瘤的发病机理的揭示和新的抗癌方案的设计提供理论基础.
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