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同源异型蛋白Prox1(Prospero homeobox1)是果蝇Prospero蛋白在脊椎动物中的同源物，它在眼球、视网膜、肝、胰以及淋巴管等器官和细胞类型的形成过程中起着重要的作用。目前，对Prox1作用机制的了解还处在起步阶段。已有的研究结果显示Prox1能与核受体LRH-1、HNF4α相互作用并抑制靶基因如CYP7A1和SHP的表达，然而Prox1作为辅抑制因子的作用机制还不清楚。另有研究结果显示Prox1可能在肿瘤发生和转移以及胆汁酸代谢调控方面发挥作用。本研究分为两个部分： 第一部分：Prox1通过表观遗传机制辅抑制CYP7A1的转录。通过免疫共沉淀联合质谱分析技术鉴定与Prox1相关蛋白的方法研究Prox1介导的辅抑制作用的可能机制。实验结果发现表观遗传抑制性复合体LSD1/NuRD的各组分，尤其是其中具有酶活性的蛋白LSD1和HDAC2与Prox1存在相互作用，GST-Pulldown实验证明Prox1与LSD1存在直接相互作用。在HepG2细胞和小鼠肝脏细胞中，通过ChIP实验发现Prox1与LSD1和HDAC2共定位于CYP7A1的启动子区。并进而通过RNAi技术KnockdownHepG2细胞内源Prox1蛋白表达发现，Prox1可以招募LSD1和HDAC2到CYP7A1启动子区从而引起H3K4的去甲基化。随后用胆汁酸处理HepG2细胞，可以观察到明显的CYP7A1转录抑制，并导致Prox1和LSD1/NuRD复合物在CYP7A1启动子区募集增多，同时在启动子区发生H3K4的去甲基化和组蛋白H3/H4的去乙酰化。这些结果显示Prox1通过与LSD1的相互作用募集抑制性复合物LSD1/NuRD到CYP7A1启动子区并通过相应的表观遗传机制发挥辅抑制作用。并且这种Prox1介导的表观遗传方面的抑制作用可能参与了生理条件下胆汁酸负反馈调控CYP7A1的转录抑制过程。 第二部分：Prox1对Wnt信号通路传导的影响。Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育和肿瘤发生的过程中起着重要作用，我们通过在293T细胞和肝癌细胞株Huh7细胞中Wnt信号通路活性的启动子分析发现Prox1可以激活Wnt信号通路，并在初步探索中发现Prox1可能是通过抑制CDH1的蛋白表达水平从而导致β-catenin不能被锚定在细胞膜上进而入核激活Wnt信号通路。