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猪瘟是由猪瘟病毒感染引起的出血性疾病，主要特征包括病毒侵染血管的凝固，血小板的减少，免疫抑制,是严重危害畜牧业生产的烈性传染病之一,被国际动物卫生组织(OIE)列入A类法定传染病，目前对猪瘟的研究大多集中于新型疫苗的研发和诊断方法的探索，但对于CSFV致病机理的分子机制仍不清楚。猪瘟是一种高传染性和致死性疾病，猪瘟的病原物猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属，它是单股正链RNA病毒，全长约12.3kb，包括5′、3′非编码区和一个开放阅读框，CSFV基因组首先翻译成1个多聚蛋白前体．前体聚蛋白在宿主和病毒的蛋白酶共同作用下被切割成为12个具有独立功能的蛋白，其中就包括8种非结构蛋白，4种结构蛋白。我国主要有两株重要的猪瘟病毒标准株，一株是强毒的石门株，分离于1945年，拥有良好的免疫原性。另一株是兔化弱毒株，国外称为C株，猪瘟兔化弱毒（Hog cholera lapinized virus,HCLV）免疫原性强，遗传性稳定，无残余毒力，被公认是最安全有效的猪瘟弱毒疫苗，因此，C株可以作为研究二价或多价疫苗的有效载体。尽管C株的安全性和免疫效力非常好，但是由于缺乏可利用的鉴别诊断方法，从而使得C株与野毒的抗体难以区分，这非常不利于猪瘟的彻底根除。欧盟至今奉行不接种政策。逆转录遗传学的发展使人类对于正链RNA病毒的研究取得了重大突破。RNA体外转录是反向遗传技术的基础，但传统方法获得的正链RNA病毒全长CDNA克隆需要在体外转录成RNA才能进行转染实验，转录过程中易造成RNA降解，加之RNA的不均一等许多因素都会影响后续试验结果。且体外转录RNA与病毒自身RNA相比感染性较低。本研究以猪瘟病毒石门株为实验材料,在原猪瘟病毒石门株全长CDNA克隆的基础上在病毒全长基因组3′端引入了丁肝核酶核心序列（HDV）及T7终止子序列，获得重组质粒pMC18-CSFV-SM-HDV-T7，使在全长克隆的基础上后续的研究不仅局限在体内转录方面，还可用在体外转录，使其在病毒基因组水平及病毒致病性研究上的应用更加灵活。在本研究中,我们首次尝试对正链RNA病毒进行分节段改造，这样改造后的病毒基因组由单股变成了双股，从而在基因组水平上将野生病毒株与实验株进行有效区分，并且检测起来也比较方便。在此基础上对C株进行改造，获得一个基因组分节段的病毒疫苗，就可以在分子水平将自然感染猪群与C株免疫猪群有效区分，从而利于猪瘟的彻底根除。同时，该研究也将为确定猪瘟病毒包装信号序列奠定基础。