【摘 要】
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目的是通过把GST和K99基因克隆入PUC18载体,完成对日本血吸虫GST和产毒大肠杆菌K99抗原基因的联合表达.方法采用电洗脱方法回收GST基因片段,PCR方法扩增K99基因片段.克隆基因
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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目的是通过把GST和K99基因克隆入PUC18载体,完成对日本血吸虫GST和产毒大肠杆菌K99抗原基因的联合表达.方法采用电洗脱方法回收GST基因片段,PCR方法扩增K99基因片段.克隆基因用限制性内切酶酶切鉴定.用EKISA、间接血凝试验、透射电镜、聚丙烯酰氨凝胶电泳、免疫印渍转移等对表达产物进行鉴定.结果表达产物可与GST血清发生显色反应,间接血凝试验阳性,电镜下重组菌与对照菌的形态有显著区别,表达产物的分子量在50KD左右.结论是CST和K99基因可以在PUC18载体中中表达出50KD的融合蛋白质,在体外具有抗原性.
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