尼帕病毒糖蛋白与受体相互作用关键位点的研究

来源 :中国科学院武汉病毒研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anmy
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亨德拉病毒(Hendra virus,HeV)和尼帕病毒(Nipah virus,NiV)是新发动物源性副粘病毒,因其高致病性,被确认为生物安全4级病原体(BSL-4)。由于这2种病毒独特的特征,ICTV把这2种病毒划分在副粘病毒科的一个新属-亨尼帕病毒(Henipavirus)。亨尼帕病毒外膜由糖蛋白G和F构成,分别介导病毒同受体结合和膜融合过程。ephrinB2和ephrinB3可作为亨尼帕病毒的功能性受体。前期在病毒—受体相互作用中多侧重于病毒囊膜蛋白的研究,而对病毒受体的研究相对较少。本文以受体EphrinB2为研究对象,通过缺失和定点突变的方法获得ephrinB2的突变体,将这些突变体瞬时表达在NiV的非敏感细胞HeLa和CHO,然后用包裹有NiV G和F的HIV假病毒颗粒感染细胞,测试ephrinB2的突变体是否影响病毒入侵。结果显示,epdnB2 G-H环完全或部分缺失导致假病毒不能入侵细胞,证实ephdnB2的G-H环在与病毒相互作用过程中起关键作用。本文进一步对ephrinB2的G-H环以及环外区的27个位点进行丙氨酸替换,结果显示大多数丙氨酸替换不影响假病毒的入侵。有意思的是G-H环内的多个突变体能增强病毒的入侵,而且孵育温度和孵育时间均不影响突变体介导假病毒入侵或亨尼帕活病毒的感染,推测这种增强病毒入侵的现象是因为突变体同G蛋白的亲和力增强所致。上述结果为抗亨尼帕病毒药物的筛选提供了潜在的药物靶点。
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