hTNGα作用相关基因BRI3的研究Ⅰ.小鼠BRI3基因的克隆及其功能的初步研究;Ⅱ.用酵母双杂合系统筛选与人BRI3相互作用的蛋白质;Ⅲ.人BRI3相互作用蛋白BRI3BP的基因克隆和定位

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为了阐明TNFα作用的分子机制,我们应用抑制消减杂交(SSH)技术,从小鼠脑血管内皮细胞(bEnd.3)中分离出若干个在hTNFα作用后差异表达基因的cDNA片段,首次发现,功能未知的小鼠基因BRI3与hTNFα的作用相关.为了对EGFP/I3融合蛋白导致的细胞死亡现象作进一步的分析,又分别构建了稳定表达抗凋亡蛋白Survivin和Bcl-2的克隆细胞株.人BRI3蛋白与小鼠BRI3蛋白在氨基酸序列上同源性为95﹪,为了进一步研究小鼠BRI3蛋白的功能,开展了第二部分的研究工作—采用酵母双杂合分析,筛选与人BRI3蛋白的相互作用蛋白质.研究工作的第三部分是,根据BRIBP1的cDNA序列,采用5RACE(Rapid amplification of cDNA end)和电子克隆技术,分离到一个全长为1.9 kb的人类新基因的cDNA.报送HUGO基因命名委员会后被命名为BRI3BP.
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