【摘 要】
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目的:研究不同浓度的陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。 方法:取三月龄wistar大鼠骨髓,分离BMSCs进行原代培养,在第一次换液后分别加
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目的:研究不同浓度的陇中损伤散含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。
方法:取三月龄wistar大鼠骨髓,分离BMSCs进行原代培养,在第一次换液后分别加入2%,5%,10%的陇中损伤散含药血清,通过倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测量骨髓间充质干细胞增殖情况;偶氮偶合法进行碱性磷酸酶阳性克隆(CFU-FALP)组织化学染色,Von Kossa染色法测定钙化结节数目,免疫细胞化学技术检测I型胶原表达;于不同时间进行ALP活性及钙盐沉积量的测定;通过上述各项指标来分析陇中损伤散含药血清对大鼠BMSCs增殖与成骨分化的影响。
结果:陇中损伤散含药血清对BMSCs的影响呈剂量依赖性,其中以浓度为10%时作用最强。MTIT结果显示陇中损伤散含药血清能明显促进BMSCs增殖;损伤散含药血清还能显著促进其成骨性分化,表现在:(1)诱导培养的早期提高细胞的ALP活性、增加CFU-FALP数、促进I型胶原蛋白的表达;(2)诱导培养的晚期增加细胞CFU-FGa数及细胞外基质中钙盐沉积量。
结论:陇中损伤散活性代谢产物能促进BMSCs的增殖和成骨性分化;陇中损伤散对骨髓间充质干细胞的这种作用可能是其促进骨折愈合、防治骨质疏松的细胞学机制之一。
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