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鸭病毒性肝炎(Duck viral hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus，DHV)引起雏鸭的一种急性、致死性、高度接触性病毒传染病。主要临床表现为痉挛、抽搐和角弓反张等神经症状，并以肝脏肿胀和表面树枝状充血或出血斑点为特征性病理变化。DHV分为3个血清型，Ⅰ型和Ⅲ型属于小RNA病毒科，Ⅱ型属于星状病毒科，3个血清型之间没有交叉保护作用。我国主要流行Ⅰ型DHV，但近年来，DHV出现了新的流行趋势，常用的Ⅰ型DHV弱毒疫苗或灭活疫苗对该病的防治效果不理想，国内外学者陆续报道分离到DHV-Ⅰ变异株，称为新型DHV。目前，Ⅰ型DHV已经成为危害全球养鸭业的主要疾病之一，带来重大的经济损失。因此，对DHV进行深入研究具有重要的意义。 本研究对华南地区不同养鸭场疑似DHV病例，经鸭胚接种分离纯化，共分离出三株DHV。通过动物回归试验、半数致死量ELD50的测定、鸭胚中和试验等确定为血清Ⅰ型DHV；同时通过RT-PCR检测，从基因分型角度验证分离毒为DHV-Ⅰ，将DHV分离毒株分别命名为A-CY株、H-CY株、GD株。 根据已发表的Ⅰ型DHV全基因组序列设计并合成引物，对三株DHV分离毒株A-CY株、H-CY株、GD株，通过RT-PCR方法，对其基因组序列进行分段克隆扩增并测序。经过生物学软件的拼接处理，成功获得三株Ⅰ型DHV分离毒株的全基因组序列，结果，不含poly(A)尾的DHV-Ⅰ基因组全长约7690bp，只含有一个多聚蛋白(ORF)，编码2249个氨基酸。将其与已发表的DHV参考毒株进行比对和遗传进化分析，结果表明：DHV分离毒株A-CY株、H-CY株、GD株处于DHV-Ⅰ的分支，彼此具有不同程度的亲缘关系，但与台湾新型和韩国新型DHV毒株处于的不同分支，核苷酸和氨基酸的同源性都比较低。因此，认为三株DHV分离毒株A-CY株、H-CY株、GD株都应归类于传统的DHV-Ⅰ。 根据本实验室已经建立的Ⅰ型DHV的SS株感染性克隆反向遗传操作平台，通过融合PCR技术，研究将SS株的VP1蛋白替换为新型DHV强毒QY3株的VP1蛋白，经菌液PCR和测序验证表明，成功构建出以Ⅰ型DHV SS株为骨架的嵌合病毒全长cDNA克隆。为深入研究DHV嵌合病毒的生物学特性、以及衣壳蛋白VP1对DHV的致病机理影响奠定基础。