卡介菌多糖核酸的分离与结构研究

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卡介菌多糖核酸(BCG polysaccharide nucleic acid,BCG-PSN)是我国首创的新型治疗和免疫调节剂。主要用于预防和治疗慢性气管炎、感冒和哮喘等疾病。可特异增强呼吸系统器官的免疫反应,从而增强患者的抗病能力,其主要的治疗机理是通过调节机体内细胞免疫、体液免疫、刺激网状内皮系统,激活单核——巨噬细胞功能,增强自然杀伤细胞功能来增强机体的抗病能力。卡介菌多糖核酸是由卡介菌经热酚法提取多糖和核酸,以灭菌生理氯化钠溶液配置而成的,本文选取卡介菌多糖核酸为研究对象,研究其结构特征,具体内容如下:在原有工艺的基础上,改进卡介菌的菌体培养方法和卡介菌多糖核酸的提取、收集方法,提高了卡介菌多糖和核酸制剂的产量和质量。卡介菌多糖核酸主要含有多糖和核酸两种组分,为明确其有效成分,将卡介菌多糖核酸经DEAE-纤维素阴离子柱层析分离,凝胶柱层析方法纯化,得到一种白色多糖——卡介菌多糖(BCG Polysaccharide BCG-PSA)。经高效液相色谱(HPLC)检验,BCG-PSA的图谱呈单一谱带,表明BCG-PSA为均一组分,分子量约3.1万,气相色谱(GC)分析表明其单糖组成为葡萄糖,属均一多糖类。BCG-PSA结构分析采用了高碘酸氧化、Smith降解、IR分析、GC分析、甲基化分析等方法。甲基化产物经酸水解、还原、乙酰化后用GC-MS联机分析。分析结果表明:BCG-PSA为少分支结构,主要由β型糖苷键构成,其主体结构由Glc组成。其中(1→6)Glc构成主链的核心结构,(1→6)Glc在0-4处有分支,支链部分由(1→4)Glc构成,平均每十个己糖残基有2个分支,末端基为1→Glc。
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