蝉拟青霉孢子粉治疗肝癌的实验研究

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:matlab_walker
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目的:  肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,全球癌死亡率排第3位,预后差,死亡率高,严重危害人类的健康和生命。目前以化疗为主,而治疗肝癌的传统化疗药物存在疗效低、毒副作用大等缺点。因此,寻求一种新的低毒高效的药物用于肝癌的预防和治疗具有重要意义。本文主要观察蝉拟青霉孢子粉对体内外人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。  方法:  1.在体外,将人肝癌HepG2细胞暴露于不同浓度蝉拟青霉孢子粉水提取物中,然后分别用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化;  2.不同浓度的蝉拟青霉孢子粉水提取物作用于HepG2细胞后;利用CCK-8法和流式细胞术分别检测药物对HepG2细胞的增殖和凋亡的影响;  3.不同浓度蝉拟青霉孢子粉水提取物作用HepG2细胞后,Western blotting检测HepG2细胞中Bax和Bcl-2蛋白的表达;  4.在体内,建立裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,分成3组,分别给予生理盐水、环磷酰胺和蝉拟青霉孢子粉治疗,实验结束后分离裸鼠皮下肿瘤称重并计算肿瘤生长抑制率;行常规病理染色,光学显微镜下观察各组裸鼠肿瘤组织病理学改变;免疫组化法检测各组肿瘤组织中Ki-67、Bax和Bcl-2的表达。  结果:  1.在体外,不同浓度蝉拟青霉孢子粉水提取物作用后的HepG2细胞在光学显微镜和荧光显微镜下呈现典型的凋亡表现。  2.不同浓度蝉拟青霉孢子粉水提取物(0.375 mg/mL、0.75 mg/mL、1.5 mg/mL)作用HepG2细胞24 h后,细胞存活率分别为93.5%、71.2%和58.1%,各用药组细胞存活率均明显低于对照组(P<0.05);不同浓度蝉拟青霉孢子粉水提取物(0.375mg/mL、0.75 mg/mL、1.5 mg/mL)作用HepG2细胞24 h后,分别诱导(6.4±2.1)%、(8.6±2.6)%和(16.5±4.3)%的HepG2细胞凋亡,与对照组(1.3±0.2)%相比较,均有显著性差异(P<0.05)。  3.与对照组比较,蝉拟青霉孢子粉水提取液作用肝癌HepG2细胞24h后,可呈浓度依赖性上调Bax的表达,而HepG2细胞中Bcl-2的表达明显被抑制,呈浓度依赖性。  4.实验第43天处死动物后,仔细剥离皮下肿瘤并称重,对照组裸鼠皮下移植瘤重量为(0.541±0.084)g,环磷酰胺组和蝉拟青霉孢子粉组皮下移植瘤重量分别为(0.169±0.068)g和(0.305±0.101)g,与对照组相比较,均有统计学意义(P<0.05);抑瘤率分别为84.35%和53.51%。  结论:  1.研究显示,蝉拟青霉孢子粉在体外可抑制HepG2细胞增殖,并显著诱导细胞凋亡;且这种抗肿瘤生长作用在体内也同样可发挥效应;  2.此作用机制可能与调控肝癌细胞中Bax和Bcl-2的表达有关。
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