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2-苯乙醇是一种具有淡雅细腻玫瑰香味的芳香醇,在食品、药品、化妆品、烟草和日化用品中有着广泛的应用,它不仅是所有玫瑰香型香气的基本组分,而且具有协合及增效作用,是多种香型配方所需的组分。随着天然2-苯乙醇市场需求量的不断增加,利用微生物转化生产天然2-苯乙醇具有广阔的市场前景和应用价值。本论文对酵母细胞转化L-苯丙氨酸生成2-苯乙醇进行了研究,主要研究内容包括:对产生菌株进行紫外诱变育种;建立酵母菌体转化法制备2-苯乙醇并对转化培养基进行优化;在油酸-水两相体系中酵母转化生成2-苯乙醇进行研究;固定化酿酒酵母与大孔树脂吸附产物相结合,进行边转化边吸附。对Saccharomyces cerevisiae CICIMY0086(T)、Kluyvermyces sinensis AS.2.1535和Kluyvermyces marxianus AS.2.1440进行了2-苯乙醇耐受性和产量的比较,选择优于其它两株菌的酿酒酵母作为出发菌株进紫外诱变,筛选得到一株产量为2.41g/L的突变株,命名为Saccharomyces cerevisiae CICIMY0086-16,遗传稳定性良好。考察了乙醇和2-苯乙醇对酵母生长的抑制作用,发现在2-苯乙醇单独存在下,浓度大于4g/L时几乎完全抑制了酵母的生长;低浓度乙醇(<50mL/L)的存在虽不能单独对酵母的生长产生太大的抑制,但增加了细胞对2-苯乙醇的敏感性,其联合毒性增大。为了提高2-苯乙醇转化速率和产量,进行酵母菌体转化实验。通过单因素实验和正交设计实验,确立了菌体转化的最佳发酵培养基为:葡萄糖55g/L,L-Phe 8g/L,YNB2.7g/L,Na2HPO4·12H2O 0.6g/L,MgSO4·7H20 0.7g/L。以0.8g/50mL的菌体浓度向上述培养基中加入酿酒酵母湿菌体,转化15h,2-苯乙醇产量达3.67g/L。该方法将发酵周期缩短了33h,2-苯乙醇产量提高了52.3%,转化率由70%提高到85%。为了解除或降低产物的抑制作用,对油酸-水两相体系中转化2-苯乙醇进行了研究,结果表明,油酸对发酵液中2-苯乙醇有着良好的萃取性能,向25mL菌体转化培养基中加入0.6g酵母湿菌体,置摇床转化9h后向体系中加入25mL油酸,27h达到发酵终点,2-苯乙醇产量达到4.55g/L,转化率92%。菌体转化法需要培养大量的酵母菌体,消耗大量的种子培养基,增加了成本,为了重复使用酵母菌体,采用海藻酸钙包埋法对酿酒酵母进行固定化。确定了海藻酸钙包埋法固定化酿酒酵母的条件为:海藻酸钠浓度3%,氯化钙浓度1mol/L,酵母菌体浓度20g/L,使用无针头注射器滴形,硬化时间2h。固定化酵母反复分批转化的研究表明,固定化酵母在第二、三、四批达到3.45g/L左右的高产出水平,随后产量缓慢的下降,但直至第九批产量仍高于3g/L,与游离酵母转化相比,表现出了较为明显的优越性。在固定化细胞转化的基础上,联合使用H103大孔树脂进行吸附2-苯乙醇的产物原位转移技术,使得发酸液中2-苯乙醇浓度始终低于1g/L,较好的解除了产物对酿酒酵母的抑制作用,用与发酵液等体积的酒精进行解吸附,所得解吸液中2-苯乙醇浓度为4.3012g/L,在18h进行一次4g/L前体补料所得解吸液中2-苯乙醇含量为5.4g/L。