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猪γ干扰素(Interferon，PoIFN-γ)具有广谱抗病毒、抗肿瘤及免疫调节等多种生物学功能。猪γ干扰素(PoIFN-γ)是由激活的T细胞和NK细胞产生的一类细胞因子，它具有高效的抗病毒感染、抑制肿瘤细胞生长和调节机体免疫功能的作用，作为生物药剂和疫苗佐剂具有广阔的应用前景。
在本研究中，将去除信号肽的猪γ干扰素基因置于毕赤酵母α因子分泌信号的DNA系列后，构建出表达载体pPICZαC-PoIFN-γ，然后将其通过电转的方式导入毕赤酵母菌X-33中。培养该菌，诱导表达出PoIFN-γ蛋白。本研究主要内容及结果如下：
根据GenBank上发表的猪γ干扰素的核苷酸序列，用软件设计一对引物P1/P2，根据该基因的酶切图谱和对表达载体多克隆位点的分析，在上游引物P1中加入了限制性内切酶EcoRI，在下游引物P2中加入了限制性内切酶KpnI。从猪外周血中分离出淋巴细胞，通过ConA刺激后，提取总RNA，通过RT-PCR方法，扩增出一条约450bp的条带。胶回收该片断，用EcoRI和KpnI两种酶分别双酶切克隆出来的PoIFN-γ蛋白基因和pPICZαC质粒。然后用连接酶连接，转化入大肠杆菌。通过质粒抽提、双酶切、PCR鉴定、质粒测序，表明PoIFN-γ蛋白基因已经成功插入到表达载体pPICZαC启动子下，并形成正确的阅读框架。
重组表达质粒pPICZαC-PoIFN-γ经SacI单酶切后，通过电击将该质粒转化进入感受态的毕赤酵母菌X-33中。将已电转的X-33菌涂布于YPDSZeocinTM选择性培养基中培养，获得多个单菌落。对阳性菌株进行扩大培养，然后进行浓缩，用甲醇对菌液进行诱导表达。诱导表达96小时，取少量上清液进行SDS-PAGE电泳分析，在25～30KD范围内有两条蛋白条带，而空载体转化宿主菌的对照未发现特异的蛋白条带。对表达蛋白进行Western-blot分析，显示表达蛋白与单克隆抗体发生特异性反应。
用上述诱导的重组蛋白对淋巴细胞作用，测定其对淋巴细胞转化为淋巴母细胞的影响。结果显示，重组蛋白对淋巴细胞的转化有显著的促进作用。
用上述诱导的重组蛋白通过细胞病变抑制法测定蛋白活性。结果表明，重组PoIFN-γ蛋白能抑制VSV对BHK细胞的感染。
本实验成功克隆出PoIFN-γ基因，构建了载体pPICZαC-PoIFN-γ，并在毕赤酵母中表达猪γ干扰素，该表达蛋白对淋巴细胞转化为淋巴母细胞有显著作用，对VSV病毒有抑制作用，显示出该蛋白在预防和治疗猪病毒性疾病方面具有潜在的应用价值。