广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学调查

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzp16828
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。在PRRSV的全基因组中,Nsp2基因和ORF5基因变异最大,对这两个基因变异的分析在一定程度上能够反映PRRSV整个基因组变异的情况。本研究即通过对广东省不同PRRSV毒株Nsp2基因和ORF5基因的测定和比较,分析广东省流行毒株的遗传变异,进而了解广东省PRRSV流行毒株的分子流行病学规律,为PRRS的防制提供必要的分子流行病学基础。 采用RT-PCR方法扩增PRRSV的Nsp2基因和ORF5基因,得到13份PRRSV Nsp2基因的部分序列片段和14份PRRSV ORF5基因片段,并进行了序列测定和分析,发现13个Nsp2基因序列的长度均为457bp,均有两个区域存在明显缺失;14个ORF5基因序列长度均为603bp,不存在缺失现象。 序列分析表明所获得的13个Nsp2基因核苷酸同源性为96.9~99.1%,与CH-1a、VR-2332、MLV、LV的核苷酸同源性分别为83.6~86.4%、67.2~69.4%,、66.8~68.9%、21.9~23.2%;14个ORF5基因核苷酸同源性为98.8~99.7%,与CH-1a、VR-2332、MLV、LV的核苷酸同源性分别为94.4~95.2%、86.7~87.9%、86.4~87.6%、54.1~55.7%。ORF7基因14个序列之间核苷酸同源性为98.7~99.7%,与CH-1a、VR-2332、MLV、LV的核苷酸序列同源性分别为94.9~96.2%、93~94.6%、93~94.6%、58.1~58.6%,表明所获得的毒株均属于美洲型。参考国内外已经发表的Nsp2基因和ORF5基因序列,采用分子生物学软件DNAStar绘制了PRRSV的遗传发育演化关系图。根据ORF5基因序列遗传演化分析结果表明美洲型PRRSV可分为4个亚群,我国目前流行的PRRSV毒株属于其中的3个亚群:以BJ-4为代表的毒株属于亚群Ⅰ;以CH-1a,HB-1和HB-2株为代表的毒株属于亚群Ⅱ;以BJ-13为代表的毒株属于亚群Ⅳ。 对广东省部分规模化猪场疑似PRRS感染猪的病料或血清进行PRRSV的分离,从中分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)野毒株,并进行了初步鉴定。结果表明分离株能在Marc-145细胞上增殖并产生相应的细胞病变,用针对PRRSV GP7的引物对细胞培养物进行RT-PCR扩增,检测结果阳性,将分离株命名为PRRSVGD株。本研究通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)GD株的E蛋白基因,克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV vector中,构建了腺病毒重组表达载体,经过抗性筛选、PCR扩增、单酶切等方法对其进行了鉴定,确定得到了含有目的基因的阳性克隆,成功构建了腺病毒表达载体pAd-E。本研究为PRRSV结构蛋白功能及其基因工程疫苗研究奠定了基础。
其他文献
肠道病原菌是临床上引起人类或动物腹泻、呕吐、脱水、肠炎为主要症状的重要病因之一,严重的甚至可以引起死亡。主要的肠道病原菌包括致致病性大肠杆菌、沙门菌、空肠弯曲菌
建国以来我国的教育经历数次的改革,多年的教学改革推进中小学语文教学始终备受关注.小学语文教师在小学语文教改中一直不断推陈出新,应用新型的教学模式和手段.但是目前的小
最好的老师是兴趣,兴趣可以让学生的积极主动性得到激发,可以让学生主动探索知识,追求完美.因此,教师要想提高教学效率和教学质量,就要找到能够激发学生兴趣的方法,即使是差
本文通过对浅谈小学品德与社会教学与时间活动的结合进行了深入的研究,阐述了小学品德与社会课程是以社会生活为基础的,主要通过品德教育为重点内容,主要是为了培养学生的品
随着全球一体化的影响和互联网的普及,大学生就业的范围和区域在不断增大.专门用途英语在其未来的职业规划中的比重也在不断增大.而目前,国内大多数院校开设的大学英语课程都
新课改的深入,对初中英语课堂教学提出了更高的要求,培养学生的自主发展能力,是初中英语课堂教学改革的重点.实现学生自主学习能力的发展,要从学生英语的听说能力培养开始.积
乳酸菌在我国畜禽规模化养殖中已经得到了广泛应用,并发现乳酸菌具有良好的免疫调节作用,但针对于乳酸菌的研究大部分以口服给药为主,其他给药途径研究较少。目前对于将细菌进行
甘蓝型油菜与诸葛菜的杂种小孢子胚发生和小苗的形态石淑稳,李再云,刘后利(华中农业大学农学系)诸葛菜为十字花科、诸葛菜属,其油酸和亚油酸含量高,亚麻酸和芥酸含量低,是油菜品质育
在小学语文教学中,阅读教学一直是教学的难点和重点,阅读教学直接影响到小学语文教学的质量.良好的阅读教学将使学生掌握听,说,读,写的学习能力,为学生未来的发展奠定坚实的
小学语文在学校教育中一直都占据着重要的地位,随着新课程的改革,小学语文的教学也不能一成不变了,要与时俱进.在小学语文教学中教师要树立情感教学的意识,要对于小学生给予