祛痰活血方对NAFLD模型大鼠肝组织miR-27a,p38MAPK通路及AQP9表达的影响

• 作 者: 杨昌碧
• 机 构: 西南医科大学
• 出 处: 西南医科大学
• 发表日期: 2021年01期
• 关键词: 非酒精性脂肪性肝病

目的：观察祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝组织微小RNA-27a（miR-27a），p38分裂原激活的蛋白激酶（p38MAPK）通路及水通道蛋白9（AQP9）表达的影响。
　　方法：32只200g左右体重的清洁级雄性SD大鼠，适应性喂养1周，随机分为正常组（n=6），造模组（n=26），造模组采用高脂饮食喂养诱导NAFLD大鼠模型，造模8周后，从造模组随机处死2只大鼠，行HE染色，确认造模已成功，剩余24只造模组大鼠随机分为4组，即模型组，祛痰活血方高、中、低剂量组（21.6g/kg、10.8g/kg、5.4g/kg）分别6只，连续干预4周后处死。自动生化测定仪检测血清ALT，AST，TG，TC， LDL，HDL水平；采用HE染色、油红O染色，正置显微镜下观察肝组织病理变化；Real-time PCR方法观察各组大鼠肝组织miR-27a、AQP9及p38MAPK mRNA的表达水平，用Western-blot检测方法测定每组肝组织P38MAPK、p-p38MAPK及AQP9蛋白的表达水平。
　　结果：1.血清生化指标显示：与正常组比较，模型组大鼠血清ALT，AST， TG，TC，LDL水平明显上升，HDL水平下降(P＜0.05)；与模型组比较，祛痰活血方各组血清ALT，AST，TG，TC，LDL水平明显下降，HDL水平上升明显（P＜0.05），其中祛痰活血方高剂量组效果最明显。2.HE染色及油红O染色显示：与正常组比较，模型组大鼠肝细胞内可见大量空泡，明显的肝细胞脂肪变性及明显增多的脂滴；与模型组比较，祛痰活血方各组脂肪变性减轻及脂滴明显较少，其中祛痰活血方高剂量组最明显。3.Realtime-PCR结果：与正常组比较，模型组肝组织中miR-27a表达水平下降，AQP9及p38MAPK mRNA表达明显上升(P＜0.05)；与模型组比较，祛痰活血方各组大鼠肝组织miR-27a明显升高，AQP9及p38MAPK mRNA表达水平下降(P＜0.05)，与祛痰活血方低剂量组、中剂量组比较，祛痰活血方高剂量组效果最显著（P＜0.05）。4、蛋白表达示：与正常组比较，模型组大鼠肝组织AQP9、p-p38MAPK的蛋白表达上调；与模型组比较，祛痰活血方各组大鼠肝组织AQP9、p-p38MAPK的蛋白表达明显下调(P＜0.05)，与祛痰活血方低、中剂量组比较，祛痰活血方高剂量组作用最明显（P＜0.05）。
　　结论：1、祛痰活血方能降低NAFLD模型大鼠血清ALT、AST、TG， TC，LDL水平，升高HDL水平；2、祛痰活血方可以减轻NAFLD大鼠肝脏脂肪变性及减少脂滴数量，以高剂量组最明显；3、祛痰活血方能上调miR-27a的表达，下调p38MAPK及AQP9 mRNA的表达；4、祛痰活血方可以通过下调p-p38MAPK的表达，进而降低AQP9的表达水平，最终减少肝脏甘油三酯、胆固醇等脂类物质的形成及蓄积，最终减轻肝脏脂肪变性程度。