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香蕉胚性细胞悬浮系(ECS)是通过生物技术提高香蕉种质水平的关键所在。然而，香蕉ECS建立极其困难，在建立后的定期继代过程中又容易被污染和发生遗传变异。因此，非常有必要找到一种安全的方法来保存香蕉ECS。超低温保存是目前能够长期而稳定地保存植物种质资源的最理想方法。本实验采用玻璃化法对香蕉栽培品种ECS进行超低温保存研究，对超低温保存程序进行探索与优化、对超低温保存过程中细胞超微结构的变化进行观察、冻存后进行ECS的重建并通过体细胞胚发生途径进行植株再生、对再生植株进行遗传稳定性分析。获得的主要研究结果如下：
1.建立了适合香蕉栽培品种ECS玻璃化法超低温保存的程序。具体为：取继代后第8 d的ECS，先用25％植物玻璃化溶液II(PVS2)室温下过渡20 min，再用预冷的100％PVS20℃下脱水5 min，过渡和脱水处理时均使沉积细胞体积为30％。然后用移液枪把处理过的材料连同玻璃化冰冻保护液一起转移到2ml冻存管中，直接投入液氮中进行冻存。经冻存(至少1h)的ECS取出后用40℃水浴解冻80 s至冻存管中的冰几乎完全融化，倒掉冰冻保护液，用附加1.2 mol·-1山梨醇的ZZ液体培养基洗涤15 min，然后转移到RDl培养基上进行暗培养以促进细胞恢复生长。
2.用上述建立的程序成功保存了‘北大矮蕉’、‘巴西蕉’和‘粤优抗1号’3个香蕉栽培品种的ECS，氯化三苯四氮唑(TFC)还原法检测细胞相对成活率均可达90％左右，并通过体细胞胚发生途径成功获得再生植株。
3.应用透射电子显微镜对‘北大矮蕉’ECS玻璃化法超低温保存过程中细胞超微结构的变化进行了观察。正常培养的胚性细胞具有完整的细胞结构，细胞中央有一个圆形的细胞核、核仁明显、染色较深，核膜规则，细胞质浓厚，里面含有许多大小不等的液泡及大量的细胞器如前质体、线粒体等。经过25％PVS2过渡后大部分细胞结构基本保持完好，细胞中大液泡变小，细胞基质变浓，出现了轻微的质壁分离现象，但细胞壁、细胞膜和质膜仍保持完好。100％PVS2脱水处理后，细胞内进一步脱水，质壁分离现象有所加重，细胞质变得更加浓厚，能存活的细胞其细胞壁、细胞膜和质膜仍保持完好，细胞核受伤害不明显、染色深，核膜规则。细胞经冷冻、解冻及洗涤后，能存活的细胞其超微结构与脱水处理后的细胞类似。恢复培养1周后，部分细胞的结构恢复至与正常生长细胞的类似。 4.以‘北大矮蕉’ECS冻存成活细胞为起始材料，成功重建了ECS。
5.从形态学和分子生物学两方面对‘巴西蕉’ECS玻璃化法超低温保存后成活细胞再生植株(苗期)进行遗传稳定性分析。结果表明：处理与对照(由未经任何处理的ECS再生出的植株)在形态学方面无明显区别；简单序列重复区间(ISSR)分子标记也显示，处理与对照相比基本无差异带出现。这初步表明超低温保存后的香蕉ECS保持了遗传稳定性。