【摘 要】
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胚胎干细胞是有早期胚胎内细胞团或胎儿原始生殖细胞分离克隆出的具有自我复制能力和发育全能性的细胞;硒在糖尿病的治疗方面具有疗效,但目前国内外尚未有报道硒在胚胎干细胞
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胚胎干细胞是有早期胚胎内细胞团或胎儿原始生殖细胞分离克隆出的具有自我复制能力和发育全能性的细胞;硒在糖尿病的治疗方面具有疗效,但目前国内外尚未有报道硒在胚胎干细胞向胰岛细胞的诱导分化中的作用.所以本研究的目的是探讨硒在体外诱导小鼠胚胎干细胞向胰岛细胞分化中的促进作用.方法:将ES-D3小鼠胚胎干细胞悬浮培养7d形成拟胚体,然后进行贴壁培养,加入分化培养液1诱导6d,然后用分化培养液2诱导6d,最后用含不同浓度的亚硒酸钠的培养基诱导20d.对诱导后获得的胰岛素产生细胞团(insulin-producingcell clusters,IPCCs)进行双硫腙染色,染色结果进行图像处理分析.进行胰岛素刺激释放试验,ELISA法测定胰岛素释放量.RT-PCR检测胰腺细胞相关基因的表达.结果:亚硒酸钠浓度在O.03μmol/L~8101μmol/L之间时,经过系列诱导后获得的IPCC其DTZ阳性率随着亚硒酸钠浓度的提高而显著升高,当亚硒酸钠浓度为270μmol/L时DTZ阳性率上升至最高点,随后开始缓慢下降;胰岛素分泌释放试验也证实270μmol/L亚硒酸钠诱导的细胞释放的胰岛素最多.RT-PCR结果进一步表明诱导获得的IPCC具有类胰岛组织的功能.结论:硒对胚胎干细胞向胰岛细胞分化具有促进作用.
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