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随着芦荟多糖(APS)的诸多生物学功能被不断地揭示和认识,APS的含量反映了芦荟的质量,其含量的测定方法的研究成为人们关注的焦点。本文应用荧光猝灭法和电化学分析法,利用茜素红(AR)的荧光特性和电活性特质在特定的条件下建立APS含量测定的新方法,结果表明这两种新建立的方法灵敏度高、操作简单、选择性好,结果与传统的紫外分光光度法一致。主要内容如下:
(1)室温下去离子水中,APS与AR可形成微紫色、非荧光性、稳定的AR-APS复合物,以AR为荧光剂,APS为猝灭剂建立APS荧光猝灭测定新方法。在二次去离子水中,APS浓度在0.444～16.65μg·mL-1范围内与AR猝灭的荧光强度(ΔF)成线性关系,对应的线性方程为:ΔF=0.8807C+1.8132,R2=0.9999,检测限为:0.1425 mg·L-1。相对标准偏差RSD≤3％,该方法已成功用于芦荟产品中多糖含量的测定,结果满意。
(2)弱酸性条件下,APS与AR形成微紫色、非电活性、稳定的AR-APS复合物。降低了AR的电流强度,且降低的电流强度(ΔInp)与APS的浓度在一定范围内呈良好的线性关系,由此建立了在多壁碳纳米管(MWNTs)修饰的玻碳(GC)电极上检测APS的线性扫描伏安法。在最佳条件下,AR在该修饰电极上有灵敏的还原峰(-0.360V vs.SCE),APS在5.0×10-9～10.0×10-8mol·L-1范围内与AR降低的还原峰电流(ΔInp)成正比,检测限为9.33×10-10mol·L-1,RSD≤0.8％,二者的结合比为1:1,结合常数为2.75×104。该方法灵敏、准确,用于模拟样品和真实样品的测定,结果满意。
(3)在弱酸性条件下,通过荧光分析法和紫外吸收光谱法研究了AR和APS的相互作用。实验结果表明AR对APS的猝灭机理为静态猝灭过程。实验得到了相应的各种参数Kq、Ksv(Kq代表生物大分子的猝灭率常数,Ksv代表动态猝灭常数)；ΔHθ、ΔGθ、ΔSθ,结果表明微紫色AR-APS复合物的形成是通过彼此间静电力的基础上的疏水相互作用。分子间的距离r,满足F(O)rster的非辐射能量转化理论；同步荧光光谱表明,AR与APS之间的相互作用,导致APS周围微环境的改变。