补肾健脾方对卵巢储备功能下降模型小鼠卵巢功能的影响

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目的:  探讨补肾健脾方对DOR模型小鼠卵巢功能的影响  方法:  1.卵巢储备功能下降动物模型的筛选研究  将36只有正常动情周期的8周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为6组,每组6只:A组为正常组,B组为豆油组,C组为异维甲酸组,D组为VCD1组,E组为VCD2组,F组为CTX组。A组正常饲喂,不做特殊处理;B组每日灌胃0.2ml大豆油,连续30日,C组30mg/kg异维甲酸连续灌胃30日;D,E两组小鼠腹腔注射160mg/kgVCD,连续注射五天;F组单次注射75mg/kg CTX;A,B,C三组小鼠均与30天后脱颈处死,D组于造模后25天脱颈处死,E组于造模35天后脱颈处死,F组于造模14天后脱颈处死。各组处死前48小时予每只10单位PMSG腹腔注射,处死前14小时予每只10单位HCG腹腔注射,处死后取输卵管壶腹部观察获卵数;取卵巢组织进行病理切片,观察各级卵泡数;采集血清用ELISA法检测AMH、FSH、E2指标。  2.补肾健脾方对DOR模型小鼠卵巢功能的影响  将36只有正常动情周期的8周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为6组,每组6只.:A组为正常组,B组为模型组,C组为DHEA组,D组为补肾健脾方低剂量组,E组为补肾健脾方中剂量组,F组为补肾健脾方高剂量组。A组正常饲喂,余五组均组采用腹腔注射160mg/kgVCD,连续注射五天的方法进行造模,造模第六天起分别予生理盐水、15mg/kgDHEA;补肾健脾方低、中、高剂量进行灌胃,连续灌胃20天;给药结束后,各组处死前48小时予每只10单位PMSG腹腔注射,处死前14小时予每只10单位HCG腹腔注射,处死后取输卵管壶腹部观察获卵数;取卵巢组织进行病理切片,观察各级卵泡数;采集血清用ELISA法检测AMH、FSH、E2指标。  结果:  1.卵巢储备功能下降动物模型的筛选研究  D组、E组、F组AMH、E2、获卵数均较正常组下降(p<0.05),FSH均较正常值升高(p<0.05)。D、E两组各级卵泡数均较正常组减少(p<0.05)F组初级卵泡较正常组减少(p<0.05),余各级卵泡与正常组差异无统计学意义。  2.补肾健脾方对DOR模型小鼠卵巢功能的影响  血清值;E组的AMH值与对照组无统计学差异,FSH较对照组低,且差异具有统计学意义(p<0.05),E2较对照组升高,差异也具有统计学意义(p<0.05)。A、F组的AMH、E2、FSH值与对照组均具有统计学差异(p<0.05);C、D两组AMH、E2、FSH均与对照组无统计学差异。  获卵数.:A、E、F组的获卵数与对照组具有差异,且差异均具有统计学意义(p<0.05);C、D两组获卵数与对照组无统计学差异。  各级卵泡数:A、F各级卵泡数均多于对照组(p<0.05),E组的小卵泡数虽与对照组无差异,但窦卵泡数明显优于对照组(p<0.05),C、D各级卵泡数与对照组无统计学差异。  结论:  1.VCD25天造模组所造模型为最优模型。  2.补肾健脾方中高剂量组小鼠卵巢功能有不同程度恢复,说明补肾健脾方可改善VCD所致的DOR模型小鼠卵巢功能。
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