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芹菜素是一种黄酮类物质,广泛存在于水果和蔬菜中。研究发现芹菜素具有很好的抑制肿瘤及抗氧化等生物学作用,因而倍受关注。目前对芹菜素的研究多集中于生物学作用方面,对其生物利用度及影响因素的研究报道甚少。本研究建立了生物样本中芹菜素的检测方法,并通过动物体内试验研究了芹菜素的生物利用度及部分影响因素。
一、建立一个检测大鼠血浆及组织中芹菜素的RP-HPLC分析方法,并用该方法对芹菜素在大鼠体内过程特性进行分析研究。生物样品经甲醇沉淀蛋白质,采用C18色谱柱(250×4.6mm,4μm),流动相为甲醇/0.1%磷酸水溶液/乙腈(v/v,25/40/35),等度沈脱,流速为1mL/min,柱温为30℃,在339nm波长下进行检测。芹菜素在大鼠血浆和组织中的线性范围分别为:0.10~2.00μg/mL(r>0.999)和0.05~2.00μg/g(r>0.999),最低检出限分别为0.03μg/mL和0.02μg/g,日内和日间变异系数(RSD)均小于8%。大鼠一次性灌胃给予芹菜素后血浆芹菜素浓度-时间曲线呈一室模型,半衰期t1/2为(116.53±22.55)min。在主要组织脏器分布特点是C肝)C肾)C肺)C卵)C脂肪>C脾)C脑)C心)C睾。
二、利用已建立的检测大鼠血中芹菜素的RP-HPLC分析方法,研究了机体铁对芹菜素在大鼠体内吸收的影响。将大鼠按初始血清铁含量随机分为四组,即高、中、低(24.82、12.41、6.21mg/kg·bw)三个剂量组和一个对照组;灌胃(硫酸亚铁)一定时间后,取尾血测定血清铁含量。待试验组和对照组大鼠血清铁含量产生差异后(P<0.05),按100mg/kt·bw灌胃芹菜素,于灌胃后20,40,60,90,180,240,300,360,420,540 min取尾血测定各时间点血中芹菜素含量。结果显示四剂量(低、中、高、对照组)组曲线下面积(AUC分别为614.97±20.965、589±16.404、569±14.746、623±18.566μg·mL-1·h)经方差分析:低剂量组与对照组AUC没有统计学差异(P>0.05);高、中剂量组与对照组AUC结果有统计学差异(P<0.01)。