拟南芥ESP、NSP和NPR4蛋白的结构生物学研究

来源 :北京化工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:JK0803_lichunfeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
硫苷(芥子油苷)是十字花科植物中一种重要的代谢产物,在一些功能因子,如表皮特异硫蛋白(ESP)、腈特异蛋白(NSP)和硫氰酸盐形成蛋白(TFP)的存在或缺失时,得到的水解产物不同:在TFP存在时可以得到腈、环硫腈和硫代氰酸盐三种产物,ESP存在时产物为腈和环硫腈,而在NSP存在时水解产物只可能得到腈。为了研究硫苷代谢不同产物的产生机制,本文对拟南芥来源的ESP和NSP蛋白进行了X射线晶体学为手段的结构生物学研究。其中ESP蛋白最终获得114个结晶条件,并在0.2M Sodium chloride、0.1M HEPES pH7.5、30% PEG400条件下获得高质量晶体。通过分子置换方法获得ESP的高分辨率晶体结构。而NSP的结晶筛选正在进行中。结构分析表明,ESP与之前解析的TFP具有相同的结构,但活性位点的氨基酸残基有所不同,使得二者具有不同的底物特异性。我们还进行了ESP潜在底物的分子对接实验,阐明了其底物结合方式。  本文的另一部分内容是关于水杨酸潜在受体蛋白NPR4的表达、纯化与结晶。水杨酸(SA)是目前唯一尚未确定受体的主要植物激素。最新的研究表明NPR1的同源旁系物NPR3和NPR4是SA的潜在受体。我们成功构建了关于NPR4不同片段长度的12个重组子。最终通过多个克隆均获得了NPR4的高纯度蛋白,并最终得到了NPR4(1-574aa)的74个结晶条件。我们主要对其中的MD38-2-21#进行优化得到形态好的晶体,遗憾的是NPR4衍射分辨率很低,还不能满足结构解析的需要。
其他文献
期刊
期刊
期刊
升级主板BIOS的目的就在于修正以前版本中的BCG(错误),并对新的硬件设备或技术规范提供支持,在升级BIOS的过程中遇到突然断电或其他一些情况时,会导致升级BIOS失败,本文对计
期刊
[课堂一幕]欣赏管弦乐曲《三只小猪》时,学生分组按序进行音乐剧表演:一组念白,一组律动,一组歌唱,如谱例:rn歌唱时,有一学生对“我们才不怕大灰狼”这句提出了质疑:“眭老师
期刊
背景和目的:哮喘的发病机制目前尚未完全研究清楚。研究发现,应用新型Th2细胞上表达的化学趋向性受体同种分子(chemoattractant receptor homologous molecule expressed on T
第一部分大鼠胰岛分离纯化及培养条件的优化选择   目的:   1.通过对比两种不同的胰岛分离纯化介质对胰岛活性的影响,探讨bFGF、SOD对大鼠胰岛在保温培养期间活性的影响
目的:  考察黄芪甲苷(ASI)预防小鼠EAE的药效,并在筛选出黄芪甲苷药效作用的基因靶点Egr1的基础上,分别使用人神经细胞SH-SY5Y细胞模型探讨Egr1基因对神经细胞生长的影响,以及
本文主要介绍了用于傅里叶变换光谱仪的不同类型的干涉仪结构,主要包括具有挠曲动镜的驱动结构的干涉仪、具有双动镜驱动结构的干涉仪、采用双面反射动镜结构的干涉仪、动镜