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目的:探讨间充质干细胞(MSCs)体外对狼疮鼠(NZBW F1鼠)的免疫调节作用以及MSCs静脉移植对狼疮鼠的治疗作用,为MSCs用于治疗系统性红斑狼疮(SLE)提供理论依据和实验基础。方法:(1)随机将NZBW F1鼠分为两组:24周龄组和32周龄组。用考马斯亮蓝法每周检测小鼠24小时尿蛋白量。分别在24周龄和32周龄时取小鼠肾脏组织切片PAS染色观察病理。取脾脏分离淋巴细胞,分别在刀豆球蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)刺激下,流式细胞仪检测T、B淋巴细胞的CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞的凋亡情况。(2)分离培养纯化健康人MSCs。无菌分离24周龄NZBW F1鼠脾脏淋巴细胞,在刀豆球蛋白A(ConA)刺激下,将NZBW F1鼠脾T淋巴细胞与MSCs分别以不同比例(1:0.01,1:0.02,1:0.1)共培养,采用MTT法检测T淋巴细胞的增殖情况,用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞的凋亡和CD69、CD28的表达水平,实时荧光定量PCR法检测T淋巴细胞IL-10、IFN-γmRNA水平。(3)分离培养纯化健康人MSCs。将12只NZBW F1鼠随机分为移植组和对照组。24周龄时移植组尾静脉回输MSCs,对照组注射等体积无血清DMEM培养液。每周测体重、尿量,并用考马斯亮蓝法检测24小时尿蛋白量。移植8周后处死小鼠,采用ELISA法检测血清抗ds-DNA抗体水平,取肾脏组织PAS染色观察病理,用流式细胞仪检测T淋巴细胞CD69、CD28的表达,荧光定量PCR法检测T淋巴细胞IL-10、IFN-γmRNA表达水平。结果:(1)24周龄组NZBW F1鼠T细胞CD69、CD28表达及B细胞CD69表达均高于32周龄鼠(P<0.05),CD86表达无明显变化(P>0.05),T细胞凋亡率下降(P<0.05)。32周龄组小鼠24小时尿蛋白量明显增加(P<0.01),与24周龄组相比肾脏损害严重。(2)在体外MSCs均能抑制NZBW F1鼠脾T淋巴细胞的增殖(P<0.05),并呈剂量依赖性。T淋巴细胞与MSCs比例为1:0.02和1:0.1时,MSCs能抑制T淋巴细胞的凋亡(P<0.05),并促进T淋巴细胞IFN-γmRNA表达,抑制IL-10 mRNA表达(P>0.05)。T淋巴细胞与MSCs比例为1:0.01时T淋巴细胞凋亡和IFN-γ和IL-10 mRNA表达与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。不同比例MSCs对T淋巴细胞CD69、CD28的表达均无显著影响(P>0.05)。(3)移植组与对照组小鼠相比,24小时尿蛋白量下降(P<0.05),肾脏病理有所改善,抗ds-DNA抗体水平下降(P<0.05),T淋巴细胞IL-10mRNA水平下降(P<0.05),IFN-γmRNA水平升高(P<0.05)。T淋巴细胞表面标记CD69、CD28的表达无明显差异(P>0.05)。结论:(1)24周龄组与32周龄组NZBW F1鼠相比,淋巴细胞活化增加,凋亡减少,而32周龄组24小时尿蛋白明显增加,肾脏病理损害明显,这可能与NZBW F1鼠自发发病的病程有关。(2)不同比例MSCs可能通过抑制细胞增殖和凋亡,干预Th1/Th2细胞因子mRNA表达来下调NZBW F1小鼠T淋巴细胞的免疫功能。(3)与对照组相比,MSCs移植对NZBW F1鼠有治疗作用,能降低肾损,降低IL-10mRNA水平,为MSCs移植治疗SLE及狼疮肾炎提供了一定的实验依据。