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研究背景：阿尔茨海默病(Alzheimers Disease，AD)是老年人最常见的痴呆类型，严重危害老年人健康，但发病机制未明。AD的主要病理特征是β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein，Aβ)在脑内聚集为老年斑(senile plaques，SPs)。对占AD绝大部分的散发性AD(sporadic Alzheimer disease，SAD)的病因学研究发现，Aβ清除减少是其脑内Aβ聚集的主要原因。血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是大脑清除Aβ的重要途径，存在于BBB上的晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products,RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LDL receptor relatedprotein-1，LRP-1)是一对作用方向相反的Aβ跨BBB转运体，大脑对Aβ清除能力取决于两者运输Aβ量的代数和。大量研究表明脑缺血，尤其是老年人普遍存在的脑慢性低灌注与散发性AD强烈关联，可以导致Aβ增加，但具体机制仍不清楚。同时，有研究表明全身低氧性疾病的患者AD发病率较正常人升高。Egb761是中医常用的缺血脑保护药，目前常被用作治疗AD。因此研究慢性低氧对BBB上RAGE、LRP-1表达的影响对于明确Aβ增加的机制以及进一步探讨AD的病因有重要的意义。研究Egb761对慢性低氧状态下BBB上RAGE、LRP-1表达的影响以进一步探讨Egb761治疗AD的机制。
目的：1.探讨慢性低氧对BBB上RAGE、LRP-1表达的影响。2.通过研究Egb761对慢性低氧BBB上RAGE、LRP-1的影响探讨Egb761治疗痴呆的可能机制。
方法：将脑微血管内皮细胞系bEnd.3予低氧或/和Egb761(100ug/ml)干预24h、36h、48h，MTT法检测低氧或/和Egb761对脑微血管内皮细胞活力的影响，RT-PCR测定RAGE、LRP-1mRNA的表达，Western blot检测RAGE、LRP-1蛋白表达。
结果：1.Egb761对慢性低氧培养bEnd.3细胞活力的影响：低氧培养24h、36h、48h组较正常培养对照组细胞活力降低，差异有统计学意义(P＜0.05)，Egb761对低氧培养bEnd.3细胞具有保护作用。2.Egb761对慢性低氧培养bEnd.3细胞RAGE、LRP-1mRNA水平表达的影响：低氧培养24h后，RAGE mRNA表达低于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，低氧24h、36h、48h组RAGE mRNA表达呈时间依赖性增高，差异有统计学意义(P＜0.05)，低氧各组LRP-1 mRNA表达较正常对照组呈时间依赖性降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。而Egb761干预低氧培养组与低氧培养组相比，三个时段bEnd.3细胞RAGE mRNA表达均降低，48h时几乎不表达，差异有统计学意义(P＜0.05)，Egb761干预低氧培养24h及36h组LRP-1mRNA表达与低氧培养组相比增高，48h时下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。3.Egb761对慢性低氧培养bEnd.3细胞RAGE、LRP-1蛋白水平表达的影响：低氧培养24h组RAGE蛋白表达低于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，低氧24h、36h、48h组RAGE蛋白表达呈时间依赖性增高，差异有统计学意义(P＜0.05)，三时间点LRP-1蛋白的表达呈时间依赖性降低，而Egb761干预低氧培养组与低氧培养组相比，三个时段bEnd.3细胞RAGE蛋白表达均降低，而24h、36h LRP-1蛋白表达增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。
结论：1.慢性低氧培养降低bEnd.3细胞活力，而Egb761对慢性低氧培养bEnd.3细胞有保护作用。2.慢性低氧培养增加bEnd.3细胞RAGE mRNA及蛋白表达，降低LRP-1 mRNA及蛋白表达，可能因此增加Aβ入脑转运，减少向脑外的清除，导致脑内Aβ水平增加。3.Egb761可部分逆转慢性低氧状态下RAGE、LRP-1的表达，可能有利于Aβ清除出脑，发挥脑保护作用。