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目的:探讨EGFR基因突变检测新方法及在非小细胞肺癌中的临床病理意义,为非小细胞肺癌的靶向治疗提供可靠的依据。方法:应用免疫组织化学Envision方法观察140例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR、EGFR19和EGFR21外显子基因突变蛋白各自表达情况;应用寡核苷酸序列分析方法检测上述病人EGFR基因第19和21外显子突变情况;比较上述两种方法实验结果。结果:1.免疫组织化学结果1.1 EGFR蛋白表达情况140例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中有49例存在EGFR蛋白表达,阳性率为35%。其中肺腺癌组阳性表达35例(35/90,38.89%),肺鳞癌组阳性表达14例(14/50,28.0%),两组EGFR蛋白表达阳性率之间无显著性差异(x~2=1.675,p＞0.10)。1.2 EGFR第19号外显子突变蛋白(Del EGFR)表达情况140例非小细胞肺癌患者肿瘤组织,其中90例肺腺癌组中有10例DelEGFR蛋白表达阳性,肺鳞癌组均表达阴性,两组间蛋白表达阳性率之间有显著性差异(x~2=4.42,p＜0.05)。1.3 EGFR第21号外显子突变蛋白(L858R EGFR)表达情况肺腺癌组中有9例表现为L858R EGFR突变蛋白染色阳性;肺鳞癌组均表达阴性,两组间突变蛋白表达阳性率有显著性差异(x~2=3.91,p＜0.05)。2.EGFR基因19号和21号外显子突变情况2.1 DNA测序结果140例非小细胞肺癌标本中有24例患者存在EGFR第19号和21外显子突变,突变率为17.14%(24/140)。其中14例患者存在第19号外显子突变,19号外显子突变患者中10例为746-750位连续5个氨基酸缺失(DelE746-A750),其余4例为19号外显子的其他少见类型突变。另外10例患者存在第21号外显子突变,均为第858位上的亮氨酸被精氨酸代替(L858R)。24例EGFR基因突变均系肺腺癌患者,肺腺癌突变率(24/90,26.67%)高于鳞癌(0)患者(x~2=16.092,p＜0.005),两组之间差异有统计学意义。2.2两种方法检测EGFR第19和21号外显子突变结果比较实验发现19例EGFR基因突变抗体染色阳性病例均存在相应的第19号或21号外显子的基因突变,另外还有5例患者标本,其中4例是DNA测序发现存在第19号外显子其他类型突变,1例是L858R EGFR突变抗体表达阴性但DNA测序存在第21号外显子突变。两种方法检测非小细胞肺癌EGFR19和21外显子突变,结果比较无显著性差异(x~2=3.2,p＞0.05)。3.EGFR特异性突变抗体表达与患者临床病理特征之间的关系在19例EGFR特异性基因突变蛋白(delEGFR,L858R)表达阳性的患者中5例为男性,14例为女性;7例为吸烟者,12例为非吸烟者;19例均为肺腺癌患者,鳞癌患者未发现阳性表达病例。女性患者的阳性表达率(14/72,19.4%)高于男性患者阳性表达率(5/68,7.35%)(x~2=4.36,p＜0.05);肺腺癌患者的蛋白表达阳性率(19/90,21.11%)高于鳞癌(0)患者(x~2=12.21,p＜0.005);吸烟者(7/69,10.14%)与非吸烟者(12/71,16.90%)阳性表达率之间无统计学差异(x~2=1.362,p＞0.05)。结论:1.EGFR蛋白表达与肺癌的组织学类型无明显相关;2.免疫组织化学方法检测EGFR19和21基因突变蛋白均显示肺腺癌表达阳性率高于肺鳞癌,女性患者的阳性率高于男性患者;3.与DNA序列分析方法比较,运用EGFR19和21外显子突变抗体检测非小细胞肺癌组织中EGFR19和21基因突变可成为一种快捷、操作简便、结果可靠的方法,为临床筛选非小细胞肺癌最适靶向治疗患者提供可靠依据。