【摘 要】
：
目的: 构建克隆载体,分析隐匿型乙型肝炎病毒S基因的突变情况,构建其原核融合蛋白表达载体,为开发新的HBV疫苗及新的HBsAg检测试剂打下基础.
方法: 首先以ELISA法检测乙
【机 构】
：
云南省第一人民医院检验科,昆明650032
【出 处】
：
中国生物化学与分子生物学会临床应用生物化学与分子生物学分会成立大会暨第一届临床应用生物化学与分子生物学学术大会
论文部分内容阅读
目的: 构建克隆载体,分析隐匿型乙型肝炎病毒S基因的突变情况,构建其原核融合蛋白表达载体,为开发新的HBV疫苗及新的HBsAg检测试剂打下基础.
方法: 首先以ELISA法检测乙型肝炎病毒标志物(HBV M),以实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA,检出两例HBV DNA阳性的标本,即隐匿型HBV感染；同时采用分子克隆技术,通过PCR扩增获得隐匿型HBVS基因,限制性核酸内切酶EcoRI、PstI双酶切目的基因及质粒载体PUC18,进行体外重组,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组体,并对阳性重组体进行目的基因的序列分析;亚克隆PUC18-HBV S基因重组体,构建原核表达载体pThiohis B-HBV S基因重组体,转化感受态大肠杆菌TOP10,并筛选阳性重组体.
结果:筛选到两例隐匿型乙型肝炎病毒感染的样本,其HBV S基因的克隆载体与原核表达载体均构建成功,序列分析没有发现S基因突变.
结论: 采用实时荧光定量PCR检测HBV DNA,辅助诊断HBV隐匿型感染是可行的,定量检测重组体HBV DNA,可以鉴定阳性重组体,并可直观地显示克隆增殖情况；成功构建HBV S基因的克隆载体,并在国内首次成功构建融合蛋白表达载体pThiohis B-HBVS基因重组体,期望高效表达HBsAg,为今后的基础研究和临床应用奠定基础.
其他文献
本文从企业党建思想政治工作中存在的问题入手,分析并探讨创新理念在企业党建思想政治工作中的具体应用,希望可以为提高企业党建工作效率提供一些思路.
本文对新媒体技术宣传思想工作的特点和路径进行了分析,研究了新媒体环境下国企思想工作宣传的路径,为新时代宣传思想工作提供参考.
当前我们已经进入中国特色社会主义新时代,从宏观层面来说,国家面临着国际国内复杂多变形势;从中观层面来说,国企也面临着企业结构调整、业务转型、产品升级换代;从微观来说,
随着新能源技术应用的快速发展，在配电网系统当中将会有越来越多的分布式电源(distributed generation，DG)以及电动汽车(electric vehicle，EV)的接入。但是因为分布式电源受外界
[目的]观察6-OHDA致大鼠发生PD对纹状体SG的影响；探讨PD鼠纹状体移植同种胎鼠中脑细胞和皮层细胞对纹状体SG的影响及其可能机制；观察纹状体移植不同胎鼠脑细胞对PD鼠旋转行为的
智能变电站是智能电网电力流、信息流、业务流汇集的焦点，其基本要求是实现全站信息的数字化、通信平台的网络化和信息共享的标准化。能够自动完成从信息测量及采集、控制保护
政治宣传部门在开展工作的过程中,需要以当前客观形势的发展变化为主要依据,同时对于政治宣传工作在新时期面临何种挑战进行有效的应对,并通过发挥政治宣传的优势,实现在新形
防电晕带是一种可以在不均匀电场下自行均化电场分布，抑制电晕产生的非线性复合绝缘电介质，研究其在交流电压下的介电性能既有理论意义又有工程意义。本文以工程上广泛应用的非线性防电晕带为研究对象，目的在于试验探明非线性防电晕带在平板三电极和刀刃二电极下交流介电特性的影响因素和影响规律。由于对防电晕带进行交流介电特性测试，能够得到的信息只有激励电压和响应电流时域波形，因此为了获得表征非线性防电晕带的基本特性
随着社会经济的发展和现代化建设步伐的加快,作为连接各种电气设备、传输和分配电能的电缆,其使用量日益增加,电缆的绝缘老化将直接影响整个电力系统的安全运行。介质损耗因数检测作为一种非破坏性检测方式,对电缆绝缘性能的评定有重要指导意义。目前国内的介质损耗因数检测仪多是单一频率,测量过程中存在干扰问题；国外的相关产品已经采用扫频方式来进行介质损耗因数检测,但是价格昂贵。为此,本文提出了一种精度高、性价比高
随着国际形势的变化,我国经济发展水平开始不断地提升同时社会主义市场经济体制也开始不断地发生变化,在这样的形势下,企业应当有重点地、系统性地开展思想政治工作.但是从现