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IFN1@（I型干扰素簇，也称IFNα）作为慢性髓细胞性白血病(CML)的治疗药物，临床上使得接近80％的早期慢性病人达到血液学缓解。但由于白血病治疗中IFN1@耐药的出现，常常影响白血病治疗效果及预后。因此详细了解IFN1@耐药如何发生将有助于改善慢性髓细胞白血病治疗方案以提升患者的疗效及改善预后。我们前期研究发现抑制自噬能增强CML细胞包括干细胞中伊马替尼诱导的细胞毒性作用，表明白噬在CML的发生和治疗中发挥重要作用。然而自噬是否及如何调控CML细胞对IFN1@治疗的敏感性目前尚不清楚。 本课题首先研究了IFN1@对CML细胞自噬的影响。以IFN1@处理K562细胞和原代CML细胞后，Western blotting检测发现IFN1@以时间依赖方式增加细胞微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein1 light chain3，LC3)-Ⅱ的表达;透射电镜也发现IFN1@处理后K562细胞中自噬泡（自噬小体/自噬溶酶体）明显增加;而免疫荧光及组织蛋白酶B活性分析分别证实IFN1@处理后LC3阳性囊泡(LC3 puncta)的表达及溶酶体酶活性均明显增加。这些结果表明CML细胞中IFN1@具有自噬诱导剂的作用。 其次，我们研究了参与IFN1@诱导自噬的信号通路。通过基因转染、shRNA抑制关键自噬相关基因(autophagy associated gene，ATG)表达，Western blotting、免疫荧光检测结果发现抑制BECN1、ATG5、ATG7能明显减少IFN1@诱导的LC3-Ⅱ表达和LC3 puncta的形成，而抑制ULK1不能发挥相关作用，表明BECN1、ATG5-ATG7自噬因子参与了IFN1@诱导的CML细胞自噬的发生。进一步研究发现，抑制JAK能减少STAT1磷酸化，减低STAT1的转录活性和LC3 puncta的形成;而抑制STAT1同样能减少IFN1@诱导的LC3-Ⅱ表达以及LC3 puncta的聚集。通过Western blotting及免疫共沉淀检测发现RELA（也称NFκB P65）shRNA能明显减少IFN1@诱导的BECN1蛋白及mRNA表达以及BECN1与PtdIns3K的结合;而STAT1 shRNA除影响BECN1与PtdIns3K结合外还影响了NFκB活化，表明活化的JAK1-STAT1-NFκB信号通路参与了IFN1@诱导的BECN1表达及BECN1与PtdIns3K的结合。 最后我们研究了抑制自噬对IFN1@诱导肿瘤细胞凋亡的影响。通过流式细胞术检测细胞凋亡水平并以Western blotting检测凋亡效应因子CASP3活性，发现抑制自噬信号通路中关键因子ATG5、BECN1、ATG7和STAT1均可促进IFN1@诱导的肿瘤细胞凋亡及CASP3活性增加，而这种作用在HL-60人急性髓细胞性白血病细胞株、Jurkat人T细胞急性淋巴细胞白血病细胞株中同样存在。小分子自噬抑制剂氯喹能以剂量依赖方式增加IFN1@诱导的凋亡及CASP8活性，表明自噬在调控IFN1@诱导的凋亡中发挥重要作用。利用氯喹或shRNA抑制自噬可以上调CASP8及其剪切片段的表达，并上调Bid剪切片段及增加CASP9活性，表明通过药物以及基因抑制自噬能通过活化CASP8-Bid信号通路增强IFN1@诱导的凋亡。 综上所述，通过RNAi或氯喹抑制自噬增加了IFN1@在白血病中的抗肿瘤活性，CASP8依赖的凋亡信号通路可能是其中主要的作用机制。本研究通过证实自噬在白血病IFN1@耐药中的作用及其机制，提出联合自噬抑制剂可能减少IFN1@在白血病治疗中耐药的产生，从而为白血病的治疗提供新的线索和科学依据。