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研究背景据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)估计,目前育龄夫妇中不孕症的患病率已高达10%25%,且随着社会竞争、就业压力的不断增加,以及环境污染的不断加剧,不孕症患者呈逐年增长趋势。自1978年第一例试管婴儿诞生以来,体外受精-胚胎移植技术(In vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)飞速发展,已成为不孕不育的常规治疗手段,至今世界范围已有超过五百万个经IVF诞生的婴儿出生[1,2]。在我国,2015年全面放开二胎政策以来,有更多的不孕患者寻求助孕治疗,迎来了一个新的增长高峰。在IVF-ET助孕治疗过程中,获得高质量的胚胎与合适的子宫内膜环境是成功妊娠的关键。胚胎的体外培养过程既是一个胚胎生长发育过程,又是一个胚胎筛选过程,通过延长培养时间可淘汰部分发育阻滞及染色体异常的胚胎,获得发育潜能更高的胚胎。随着细胞培养设备及培养试剂的不断完善,延长胚胎体外培养时间已成为现实,胚胎移植策略也从早期的受精卵、取卵后第二天(D2)移植,发展到目前的D3移植或D5、D6的囊胚移植。但随着胚胎培养时间的延长,胚胎损耗率也不断增加,有报道D3优质卵裂胚的囊胚形成率仅为30%50%[3,4],且囊胚移植的累计妊娠率与卵裂胚相比并无显著差异,甚至更低[5]。而卵巢低反应(Poor ovarian response,POR)患者由于获卵数少,优质胚胎数及可利用胚胎数更少,往往无法培养至囊胚阶段,但更有甚者,在体外环境下培养至D3就因无可利用胚胎而导致周期取消,给患者及医师均带来沉重的精神压力。本研究旨在探讨通过减少胚胎体外培养时间,选择D2移植,是否可减少低可利用胚胎少患者的胚胎耗损率,提高胚胎种植率,改善其临床妊娠结局。第一部分IVF/ICSI中低可利用胚胎患者的胚胎移植策略【目的】探讨受精后第二天(Day two,D2)行胚胎移植在低可利用胚胎患者体外受精/卵母细胞质内单精子显微注射(In vitro fertilization or intracytoplasmic sperm inj ection,IVF/ICSI)周期的应用价值。【方法】1.研究对象:选择2015年12月2017年10月在解放军105医院生殖中心接受IVF/ICSI治疗、年龄<40岁且D2和D3可利用胚胎数≤3枚的患者作为研究对象,共346个周期;其中行D2行胚胎移植182个周期(D2组),D3行胚胎移植164个周期(D3组),自身对照比较D2与D3移植组以及本次D2移植组(82个周期)与其既往D3移植周期(79个周期)的临床结局。排除标准(为符合以下任一项者):(1)年龄≥40岁;(2)非新鲜周期移植患者;(3)D2和D3无可利用胚胎;(4)囊胚移植者;(5)患重大基础疾病和/或有酗酒、吸毒等不良嗜好者;(6)重度子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征;(7)子宫先天性畸形及宫腔粘连者。2.统计学方法:采用SPSS16.0统计软件包建立数据库做统计学分析。定量资料符合正太分布,组间比较采用t检验;不符合正太分布者,组间比较采用秩和检验;分类资料或率的比较采用χ2检验,以α=0.05为检验水准,P<0.05认为差异有统计学意义。【结果】1.D2移植组与D3移植组比较除D2移植组的抗苗勒管激素(anti-Müllerianhormone,AMH)及窦卵泡数(antral follicle count,AFC)显著低于D3移植组(P<0.05)外,两组间其余一般情况比较无统计学差异(P>0.05)。D2移植组的获卵数、MⅡ率、受精率、卵裂率及胚胎耗损率(embryo consumption rate,ECR)均显著低于D3移植组(P<0.05),但优胚率显著高于D3移植组(P<0.05);两组间Gn用量和天数、移植日内膜厚度、移植胚胎数、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率及异位妊娠率均无显著性差异(P>0.05)。2.D2组自身对照比较D2移植的获卵数、受精率、ECR及无可用胚胎率均显著低于既往D3移植组(P<0.05),但优胚率、胚胎种植率及临床妊娠率均显著高于既往D3移植周期(P<0.05)。【结论】对低可利用胚胎患者,选择D2行全胚胎移植不失为一个有价值、可供选择的胚胎移植策略。第二部分高龄低可利用胚胎患者的胚胎移植策略【目的】探讨不同胚胎移植策略对高龄低可利用胚胎患者IVF/ICSI临床结局的影响。【方法】1.研究对象:选择2015年12月2017年10月在解放军105医院生殖中心接受IVF/ICSI治疗、年龄≥40岁且可利用胚胎数≤3枚的患者作为研究对象,共184个周期;其中D2行胚胎移植89个周期(D2组),D3行胚胎移植95个周期(D3组),自身对照比较D2与D3移植周期以及本次D2移植组(55个周期)与其既往D3移植周期(65个周期)的临床结局。排除标准(为符合以下任一项者):(1)年龄<40岁;(2)非新鲜周期移植患者;(3)D2和D3无可利用胚胎;(4)囊胚移植者;(5)患重大基础疾病和/或有酗酒、吸毒等不良嗜好者;(6)重度子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征;(7)子宫先天性畸形及宫腔粘连者。2.统计学方法:采用SPSS16.0统计软件包建立数据库做统计学分析。定量资料符合正太分布,组间比较采用t检验;不符合正太分布者,组间比较采用秩和检验;分类资料或率的比较采用χ2检验,以α=0.05为检验水准,P<0.05认为差异有统计学意义。【结果】1.D2移植组与D3移植组比较除D2移植组基础卵泡刺激素(baseline follicle-stimulating hormone,b FSH)显著高于D3移植组(P<0.05)及D2移植组曾行IVF/ICSI次数、AMH及AFC显著低于D3移植组(P<0.05))外,两组间其余一般情况比较无统计学差异(P>0.05);D2移植组的获卵数、MⅡ率及ECR均显著低于D3移植组(P<0.05),但优胚率显著高于D3移植组(P<0.05);两组间Gn用量和天数、移植日内膜厚度、受精率、移植胚胎数、胚胎种植率、临床妊娠率及早期流产率均无显著性差异(P>0.05)。2.D2组自身对照比较D2移植的获卵数、ECR及无可用胚胎率均显著低于既往D3移植组(P<0.05),且优胚率、胚胎种植率及临床妊娠率均显著高于既往D3移植周期(P<0.05)。【结论】对既往D3移植失败且低可利用胚胎的高龄不孕患者,选择D2行移植不失为一个可供选择、有价值的胚胎移植策略。