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目的:探讨规范化包虫资源库的建库条件,标本的采集、保存和质量控制,以及库的信息化管理等有关问题。摸索一套适合该院实际情况的建库方法,为更加系统地开展进一步的相关研究做好准备。本研究通过规范化的标本采集,借鉴国内外其他成功的标本库的经验,在原有的包虫病资源库的标本采集方法的基础上进一步改进和完善,使临床包虫病标本的采集更系统、规范合乎今后发展的需要;同时,将标本库的质量检验作为研究重点,保证了所采集的临床包虫病标本的研究质量,为今后包虫病资源库的进一步开发、利用提供重要的质量保证。
方法:选取2006年7月~至今在石河子大学医学院肝胆外科以肝包虫病为主要诊断而行手术切除的患者的手术标本。详细记录每例需手术的包虫住院病人的临床资料。采集手术时切除的包虫组织(包括包虫外囊、内囊和周围组织)分割后用编号的灭菌锡箔纸包好,迅速投入液氮转移罐,分别按要求处理后-80℃冰箱保存。经病理检查后剩余的组织制作蜡块保存。全部病例均经过临床与病理学检查予以证实。随机抽取其中部分组织使用Trizol试剂提取总RNA,以鉴定组织成分的完整性。并总结其中的经验和方法,不断完善包虫资源库的的质量控制和管理体系。
结果:2006年7月至今(2008年1月)收集标本63例,包括新鲜标本、血清标本、蜡块组织共计1017份,及每例标本的详细临床、随访资料。并对其中11例,47份新鲜组织标本进行总RNA检测,经1%琼脂糖凝胶电泳检测未见显著降解,经紫外分光光度计分析得出其OD260/OD280=1.6~2.0。并结合自身实际情况规范了标本采集的流程,完善了质量管理体系,保证包虫资源库的质量。
结论:
1.本实验所采用的标本采集方法可保证标本库的质量,有利于更有效地利用病例资源。
2.规范化的包虫资源库的建立,为今后分子生物学、基因工程及流行病学等的相关研究打下了基础,有利于有效地利用资源。