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本论文从来自全国20个省市100份土样中分离得到的2000株放线菌中筛选出具有杀线虫活性的菌株155株,对这些活性菌株进行了系统亲缘关系分析,并对杀线虫活性较强的菌株SDYM18进行了鉴定以及活性产物的初步分离。主要研究结果如下:
1.通过对6种培养基分离土壤放线菌效果的比较,确定了ISP5和HVA培养基作为分离用培养基。利用这两种培养基从全国20个省市100份土样的2000株放线菌,并以全齿复合线虫(Panagrellus redivivus)为靶标从中筛选出155株对线虫致死率在80%以上的食线虫放线菌。其中,包括18株对松材线虫致死率在80%以上的活性菌株。进一步的复筛,得到4株36小时内对两种线虫致死率在95%以上的强活性菌株。
2.通过对70株食线虫放线菌16S rRNA基因序列的Blast比对和系统发育分析,结果表明这些活性菌株分属以下6个大的类群:a.链霉菌属(Streptomyces);b.以北里孢菌属(Kitasatospora);c.诺卡氏菌属(Nocardia);d.拟无枝菌酸菌属(Amycolatopsis);e.考克氏菌属(Kocuria);f.节杆菌属(Arthrobacter)。其中链霉菌属是优势类群,占分析菌株的80%。
3.分析了14株高活性菌株对热和酸碱稳定性,筛选出对热和酸碱菌株SDYM18,通过形态学特征和16S rDNA序列的同源性,将该菌株鉴定为科罗拉多拟无枝酸菌(Amycolatopsis coloradensis)。对其活性成分初步分离的结果显示,活性成分集中在正丁醇相和乙酸乙酯相。