健脾益气合剂对抗生素脱污染小鼠肠道菌群影响的研究

来源 :广西中医学院 广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pankerong
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目的:观察健脾益气合剂对实验性肠道菌群失调症的影响。   方法:对象:选用清洁级小鼠为实验对象,经连续3天给予氨苄青霉素生理盐水稀释液灌服后的小鼠为造模组。造模成功后,造模组又分为3组:连续7天给予无菌生理盐水灌服的小鼠为阴性对照组(b组),连续7天给予丽珠肠乐生理盐水稀释液灌服的小鼠为阳性对照组(c组),连续7天给予健脾益气合剂生理盐水稀释液灌服的小鼠为中药治疗组(d组);同时设置正常对照组(a组):做正常健康小鼠分析,第1天至笫10天,每天给予无菌生理盐水灌服。方法:(1)症状学观察:观察小鼠肛门变化情况、小鼠毛发、小鼠采食情况、小鼠精神状态、小鼠的活动情况、及是否畏寒;观察小鼠粪便变化情况、实验期间小鼠体重的变化及盲肠形态;(2)盲肠内容物细菌培养,采用稀释度平板计数法分析小鼠肠道菌群变化;(3)盲肠内容物直接涂片。   结果:(1)症状学观察结果:①一般情况:造模后,造模组小鼠均出现行动迟缓无力,活动减少,毛色枯黄,摄食量减少,肛门污秽。进行治疗后,c组和d组小鼠精神状况基本恢复正常,体重亦明显回升。b组的小鼠仍行动迟缓无力,摄食量减少,毛色枯黄。②体重情况:造模前各组间小鼠的体重无差异(P>0.05);造模完成后(即实验第4天),造摸组间的体重无差异(P>0.05),但造模组与正常对照组的体重相比存在明显差异(P<0.01);治疗完成后(即实验第11天),a、c与d组的体重无差异(P>0.05),但b组与a、c、d组的体重存在明显差异(P<0.01)。③腹泻情况:造模后(即实验第4天),三组(b组、c组和d组)100%均为中、重度腹泻。治疗完成后(即实验第11天),b组中、重度腹泻仍有60%,解正常大便为20%。c组解正常大便率达100%;d组解正常大便率为80%,且已无中、重度腹泻。④盲肠情况:造模后,造模组小鼠的盲肠充盈胀大(可比正常小鼠的盲肠胀大约2~5倍),肠壁变薄,盲肠内容物水状。进行治疗后,c组和d组的小鼠盲肠形状和盲肠内容物基本恢复正常;b组60%小鼠的盲肠形状仍保持充盈胀大,无明显回缩,盲肠内容物仍为水状。a组的小鼠在实验过程中,它们的精神状况、体重、大便和盲肠形状等均为正常,无明显变化。(2)各组肠道菌群动态定量分析:造模完成后(即实验第4天),与正常健康组比较,造模组小鼠的正常菌群数量剧降,其中EC、BS培养基中无菌生长,肠杆菌和乳杆菌则减少非常显著(均P<0.001)。治疗后第11天,阴性对照组的四种肠道正常生理菌数呈水平逐渐递升,但仍较正常健康小鼠肠道生理菌数水平明显偏低(P<0.01)。c组、d组的肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌增加均为非常显著(P<0.01),肠杆菌为增加显著(P<0.05)。(3)盲肠内容物直接涂片结果:①造模完成后造模组100%符合Ⅲ菌群失调症的镜下表现,平均每视野细菌数均<20个;球杆比例明显失调;酵母菌大量滋生。②治疗完成后(即实验笫11天)c组、d组各种细菌进一步增加,平均每视野细菌数均>50个,基本上增加到给药前的水平;球杆比例恢复正常;酵母菌镜下未见。b组的细菌数亦有所回升,但恢复速度较慢。至实验第11天止,b组仍有60%的小鼠盲肠内容物的每视野细菌数<20个。   结论:(1)首次证实健脾益气合剂对抗生素脱污染小鼠的肠道菌群有着和丽珠肠乐类似的调节作用。健脾益气合剂对实验性抗生素脱污染小鼠的肠道菌群失调症有迅速而明确的纠正作用,可使肠道微生态失衡得到调整恢复,但其确切的疗效机制有待探讨。(2)证实大剂量的氨苄青霉素予小鼠灌服,能造成典型的Ⅲ度菌群失调模型。(3)盲肠内容物直接涂片的结果较为接近细菌培养的结果,根据本次实验的结果对比,二者的符合率达100%。故本作者认为直接涂片可应用于不同程度的菌群失调,直接涂片可以快速诊断菌群失调症,有利于指导临床治疗。
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