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乳房炎是奶牛的一种多发病和常见病，严重引发奶牛体况下降、产奶量下降，造成重大的经济损失，同时导致奶品质量降低，致病菌还构成食品安全的潜在威胁。针对奶牛乳房炎的主要致病菌-金黄色葡萄球菌(金葡菌)进行了多年的防治工作，但迄今仍未获得安全有效的奶牛乳房炎疫苗。
本课题目的：利用分子佐剂牛C3d改造真核表达载体，同时针对金葡菌奶牛乳房炎的感染机制选择多种保守性的关键抗原靶位基因，构建免疫增强型重组金葡菌DNA疫苗，经免疫接种小鼠动物模型，考察疫苗的体液免疫，细胞免疫效果及其免疫保护作用，探讨其作为金葡菌奶牛乳房炎防治疫苗的可行性。
通过分离、克隆并重组牛C3d基因，成功构建新颖的免疫增强型真核表达载体pcDNA3.1(+)-C3d3，同时分离和克隆金葡菌抗原靶位基因ClfA、FnBP、TRAP(后二者融合为Minigene)，利用二种真核表达载体共成功构建四种DNA疫苗(pcDNA3.1(+)-ClfA，pcDNA3.1(+)-Minigene，pcDNA3.1(+)-ClfA-C3d3，pcDNA3.1(+)-Minigene-C3d3)。免疫接种小鼠动物模型结果显示，四种DNA疫苗都能成功激发小鼠产生体液免疫反应(抗体效价分别为3200，3200，6400，和6400)和细胞免疫反应(SI值分别为1.521±0.3267，1.682±0.2542，1.813±0.2567和2.021±0.2282)，其中增强型DNA疫苗的免疫效果均强于对照组(体液免疫增强约100％；细胞免疫增强约20％)，同时攻毒实验初步显示其免疫保护的作用。上述结果提示，构建的DNA疫苗不仅可作为预防性疫苗，而且可能发展为治疗性疫苗。
利用原核表达系统pET32a(+)获得纯度为95％的新型重组蛋白疫苗Trx-Minigene和Trx-ClfA(表达产量分别为178.5mg/L和80.6 mg/L)，免疫小鼠获得高滴度的特异性抗体(最高抗体效价均达到819200)，结果表明可能成为良好的候选金葡菌预防性疫苗。上述工作为蛋白疫苗与DNA疫苗协同应用、最终有效防治金葡菌奶牛乳房炎提供了基础。
奶牛免疫实验正在进行中，2次免疫后得到的初步体液免疫结果(DNA疫苗的抗体效价为50，蛋白疫苗为200)，提示本实验研制的DNA疫苗和蛋白疫苗可用于预防奶牛乳房炎。