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目的：近年来，随着人们生活方式，饮食结构的改变，大肠癌的发病率呈逐年上升趋势。奥沙利铂(Oxaliplatin，L-OHP)作为第三代铂类抗癌药物，具有良好的抗肿瘤活性。UCN-01(7-hydroxystaurosporine)作为一种新型的靶向性治疗药物，能够解除G2期检查点，促使细胞死亡。我们将探讨L-OHP与UCN-01单独及联合应用对大肠癌细胞的增殖抑制作用及其机制。
方法：用MTT法检测L-OHP、UCN-01单药，及两药联用对大肠癌HCT-116细胞的生长抑制作用并计算药物对细胞的半数抑制浓度(IC50)；应用CalcuSyn2.0软件(Biosoft，USA)计算L-OHP和UCN-01联合用药指数(Combination index，CI)；流式细胞术检测药物对大肠癌细胞凋亡和周期的影响；免疫组化法观察药物作用后细胞形态学的变化。
结果：L-OHP和UCN-01对HCT-116均具有增殖抑制作用，其抑制作用随药物浓度的增加而增强。L-OHP单独作用24h后，其IC50为19.65±1.20μmol/L。单独应用UCN-01作用24h后，IC50为530.88±41.32nmol/L。浓度为6.25μmol/L的L-OHP作用于大肠癌HCT-116细胞24h后，生长抑制率为27％，其与100nmol/L的UCN-01联合应用时对HCT-116细胞杀伤作用明显增强，杀伤率为50％。流式细胞术检测到低浓度奥沙利铂(6.25μmol/L)主要诱导大肠癌HCT-116细胞系发生凋亡，凋亡率为6.97％。L-OHP(6.25μmol/L)与UCN-01(100nmol/L)联用后死亡的细胞明显增加，为31.54％，而凋亡细胞只占4.13％，由此可见两药联用后细胞并非完全死于凋亡，而是出现了非凋亡方式的死亡。免疫组化检测发现两药联用后肿瘤细胞的形态发生改变，巨核细胞及多核细胞明显增多，即发生了丝裂灾变形态学改变，同时细胞周期检测显示大肠癌HCT-116细胞发生了G1期阻滞，进一步证明丝裂灾变的发生。
结论：L-OHP对大肠癌细胞HCT-116的体外杀伤作用较强，并随奥沙利铂药物浓度的增加而增强。与单独应用L-OHP或UCN-01相比，两药联合应用能够大大提高对肿瘤细胞的杀伤作用。流式细胞术检测到6.25μmol/L的L-OHP单用主要引起大肠癌细胞发生凋亡，而两药联用死亡细胞明显增多，即出现了非凋亡方式的死亡。本研究对于深入理解肿瘤细胞死亡的本质、寻找新的肿瘤治疗靶点并最终实现靶向治疗具有重要的理论意义和临床应用价值。