【摘 要】
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新城疫（ND）是对养禽业危害最大的病毒性传染病之一，而新城疫病毒（NDV）F48E8株则是中国的标准强毒。为了研制有效的ND基因工程疫苗，本实验构建了表达NDV F48E8株融合蛋白（F蛋白）基因的
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新城疫（ND）是对养禽业危害最大的病毒性传染病之一，而新城疫病毒（NDV）F48E8株则是中国的标准强毒。为了研制有效的ND基因工程疫苗，本实验构建了表达NDV F48E8株融合蛋白（F蛋白）基因的重组鸡痘病毒（rFPV），并测定了rFPV的免疫效力，为NDV基因工程苗今后的开发提供了试验基础。现将本实验所做的工作从两个方面概述如下： 1．从含有NDV F48E8 F基因的质粒PE1／E2-3，运用PCR法扩增的F基因，并将基因定向克隆到转移载体pEFgpt12S的Ecogpt基因下游，构建成转移载体pEF-2。以磷酸钙转染的方法转染含有F基因的重组鸡痘病毒rFPVNDF感染的鸡胚成纤维细胞，经有限稀释法挑取病毒蚀斑，；利用MXHAT培养基而进行负性筛选，得到了稳定生长新的重组鸡痘病毒rFPV-2。该重组毒具有两个F基因。间接免疫荧光试验表明，rFPV-2感染的鸡胚成纤维细胞中表达了NDV的F基因，与rFPVNDF相比，荧光数目更多，表明F蛋白的表达量更大。 2．评价了重组毒rFPV-2、rFPVNDF的免疫效力。在用SPF鸡进行的一次免疫效力试验中，9日龄的试验鸡接种rFPV-2和rFPVNDF后，能产生对大剂量NDV强毒的保护，保护率分别为50％和43％。将rFPV-2和Lasota结合使用保护率和疫苗对照组Lasota相同。从接种rFPV-2和rFPVNDF的试验鸡中检测出了中和抗体。在用用SPF鸡进行的二次免疫效力试验中rFPV-2和rFPVNDF产生的保护率为79％和64％，而rFPV-2和Lasota结合使用保护率超过了对照组Lasota，达到了100％。
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