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目的：研究硒对幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素(VacA)的影响。
方法：采用盐析、透析、层析、抽滤等方法提纯空泡毒素，通过琼脂糖凝胶电泳，基因序列分析，免疫印迹分析及细胞培养，细胞爬片，瑞氏—姬姆萨染色，电镜及流式细胞仪检测等方法检测了硒对幽门螺杆菌分泌的VacA及大肠埃希菌中表达的重组毒素蛋白功能的影响。重组VacA产物经6XHis标记Ni-TEDTM试剂盒纯化，SDS-PAGE电泳及Westernblot鉴定。间接ELISA法检测其抗原性。
结果：一定浓度的硒可使幽门螺杆菌形态发生球形变，鞭毛及菌毛出现脱落，溶血作用减弱，通过抑制Hp生长减少VacA产量从而使空泡毒作用减弱；通过抑制表达VacA的大肠埃希菌的生长，减少重组VacA表达量，但不影响其编码基因序列；能增强重组VacA对胃癌细胞的抑制作用，使细胞分裂指数、集落形成率、S期细胞数量降低，G1期细胞总数增加；使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素，并随硒浓度增加颜色加深；经SDS-PAGE分析，融合基因表达的蛋白分子量约为110KD，重组蛋白纯化后，经ELISA法检测显示，该重组蛋白可被VacA抗体识别，具有良好的抗原性。
结论：一定浓度的硒能抑制Hp生长，可使Hp的形态发生球形变、菌毛和鞭毛出现脱落；可使重组VacA表达量减少，但不影响其编码基因序列；能增强重组VacA对胃癌细胞的抑制作用；可使表达重组VacA的大肠埃希菌产生脂溶性砖红色色素，并且随硒浓度增加颜色加深；融合基因表达蛋白分子量约为110KD，该重组VacA具有良好的抗原性，从而为Hp蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的研究奠定了基础。硒能抑制Hp的生长，为硒产品的研制和开发提供了理论依据。