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目的:制备出不同尺寸的纳米硒,在确定其粒径大小,形貌及硒含量的基础上,探讨不同尺寸纳米硒的体外抗氧化能力和小鼠体内的保肝、降糖活性。方法:以PEG2000为模板,亚硒酸为硒源,采用超声辅助Vc还原亚硒酸的方法制备不同尺寸纳米硒;以纳米硒的粒径大小为指标,先采用单因素的方法,考察PEG2000的浓度、Vc与亚硒酸的摩尔比、超声时间、超声温度等因素对形成纳米硒粒径的影响;用正交实验的方法确定出小尺寸纳米硒的制备工艺,在此基础上,改变合成的工艺条件制备出尺寸不同的纳米硒。以粒径仪、胶体溶液的双波长法、扫描电镜等对不同尺寸的纳米硒进行表征。用邻苯二胺紫外分光光度法测定其硒含量;以Vc为对照,采用水杨酸法测定不同尺寸纳米硒清除羟基自由基的作用;采用紫外分光光度法测定不同尺寸纳米硒对DPPH自由基的清除作用;采用普鲁士蓝法测定不同尺寸纳米硒的还原能力。取SPF级昆明种小鼠,分为正常组、阴性组、阳性组、小尺寸、中尺寸和大尺寸纳米硒组,连续灌胃给药14 d,除正常组外,其他小鼠用四氯化碳诱导急性肝损伤,末次给药24 h后,取血,测定血清中生化指标来评价肝损伤程度,取肝组织,对其进行病理学观察;取SPF级昆明种小鼠,除正常组外,其他组小鼠以四氧嘧啶诱导小鼠糖尿病,将确定造模成功的小鼠随机分为阴性组、阳性组、小尺寸、中尺寸和大尺寸纳米硒组,连续灌胃给药21 d,末次给药24 h后,取血,测定血清中生化指标,取小鼠肝、肾组织,对其进行病理学观察,以评价不同尺寸纳米硒的体内保肝、降糖作用。结果:根据正交结果制备小尺寸纳米硒条件为30℃下超声0.5 h,Vc与亚硒酸比为3:1,PEG2000浓度为3.0 mg·mL-1,粒径约为60 nm左右;改变制备条件筛选中尺寸纳米硒粒径约为80 nm左右;大尺寸纳米硒粒径约为100 nm左右。经扫描电镜测定不同尺寸的纳米硒形貌均为球型,且分散均匀。经测定小尺寸、中尺寸、大尺寸纳米硒硒含量分别为130.89μg·mL-1,221.67μg·mL-1,392.94μg·mL-1。纳米硒体外抗氧化结果表明,Vc及小尺寸纳米硒清除羟基自由基的IC50值分别为0.075 mg和0.122 mg;Vc与小尺寸、中尺寸和大尺寸纳米硒对DPPH自由基清除作用的IC50值分别为Vc 0.027 mg,小尺寸纳米硒0.025 mg,中尺寸纳米硒0.035 mg,大尺寸纳米硒0.038 mg;Vc及纳米硒的还原能力大小为Vc>小尺寸>中尺寸>大尺寸纳米硒。小鼠体内保肝实验表明,小尺寸和中尺寸纳米硒对CCl4所致的小鼠急性肝损伤有较好的保护作用,可以降低小鼠肝重指数和小鼠血清中ALP活力,显著降低小鼠血清中ALT、AST活力,白球比和胆红素指标（P<0.01）,升高TP和HDL-C含量;通过肝组织病理学观察可知,小尺寸和中尺寸纳米硒可以保护肝细胞,减少肝损伤,其效果与联苯双酯相当,小尺寸纳米硒效果强于中尺寸强于大尺寸纳米硒。小鼠体内降糖结果表明,纳米硒可以有效增加糖尿病小鼠的体重,并且在糖尿病第一周到第二周对糖尿病治疗效果与阳性组无显著性差异（P>0.05）,纳米硒在糖尿病给药第一周后能显著降低小鼠血糖,其中小尺寸和中尺寸纳米硒在第二周到第三周与阴性组均存在极显著性差异（P<0.01）;在饮食量上,纳米硒始终与阴性组存在极显著性差异（P<0.01）;饮水量上,小尺寸和中尺寸纳米硒均与阴性组存在极显著性差异（P<0.01）,而与阳性组无显著性差异（P>0.05）;小尺寸纳米硒能升高小鼠血清中TG、TP、TC含量,且与阴性组存在显著性差异（P<0.05）,小尺寸和中尺寸纳米硒能显著降低小鼠血清中UREA含量（P<0.01）;从糖尿病小鼠的组织HE染色观察可知,糖尿病未对小鼠肝脏有过多损害,但阴性组的肾组织遭到破损严重,不同尺寸纳米硒组及阳性组肾细胞损伤较小,其中小尺寸和中尺寸纳米硒肾细胞形态与阳性组相当。结论:该制备方法简单,易于操作,制备的纳米硒粒径集中,形貌稳定,分散均匀。不同尺寸的纳米硒具有较强的体外抗氧化作用,且抗氧化作用强度与纳米硒粒径呈负相关,即粒径越小,效果越好,此外,纳米硒对CCl4所致的急性肝损伤及四氧嘧啶所致的糖尿病小鼠具有良好的保护及治疗作用,且效果均以小尺寸纳米硒显著,因此,在保肝和降糖作用上也存在纳米硒粒径越小疗效越好的结果。这为纳米硒在今后的延缓衰老、保肝及降糖等生物活性的研究上提供实验基础和理论依据。