【摘 要】
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核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是常见的死体营养型植物病原菌,其寄主范围十分广泛,可以侵染400多种植物包括多种重要作物,引起作物菌核病,并造成严重的产量损失和品质下降。核盘菌寄生于油菜引起的菌核病,它会对油菜生产造成极大的危害,常常导致极大的经济损失。核盘菌的菌核可抵御不利的生存环境,在菌核病的病害循环中起重要作用。筛选核盘菌菌核形成过程中基因
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核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是常见的死体营养型植物病原菌,其寄主范围十分广泛,可以侵染400多种植物包括多种重要作物,引起作物菌核病,并造成严重的产量损失和品质下降。核盘菌寄生于油菜引起的菌核病,它会对油菜生产造成极大的危害,常常导致极大的经济损失。核盘菌的菌核可抵御不利的生存环境,在菌核病的病害循环中起重要作用。筛选核盘菌菌核形成过程中基因的差异表达,并研究其在菌核形成过程中的功能,有助于探索控制核盘菌菌核形成的防治措施,对生产实践中防治菌核病具有重要意义。本研究克隆出核盘菌线粒体载体蛋白编码基因序列SsMit1,根据同源重组的原理,并使用分割标记法对目标基因进行基因敲除,利用PEG介导原生质体转化技术获得SsMit1敲除突变菌株。通过不断挑取菌丝尖端的方法纯化出纯和的敲除突变体。对SsMit1在核盘菌生长、发育及致病过程中的作用进行了研究,主要结果如下:(1)与野生型相比,SsMit1缺失突变体菌丝生长速率有差异,菌丝尖端分支多且长度变短,产酸能力没有明显改变,菌核发育存在差异,突变体仍然可以形成菌核但形成时间推迟,菌核干重和菌核数量不存在显著差异。(2)与野生菌株相比,SsMit1缺失突变体接种在油菜和大豆离体叶片上,病斑直径明显较小,推测SsMit1与核盘菌的致病力相关。(3)在刚果红(Congo Red)、SDS、山梨醇和NaCl、KC1等胁迫因子作用下,与野生型菌株相比,突变体在含有刚果红(Congo Red)、SDS、山梨醇、NaCl、KC1的培养基上生长明显受到抑制,且在这5种胁迫下突变体均不能完成菌核的发育。综上所述,SsMit1参与了核盘菌的菌核发育和致病过程,该结果为核盘菌的防治提供理论基础,其具体的分子机制需要进一步研究。
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