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目的：喉含有血管、神经、软骨、腺体等多种组织成分，其移植后面临着更为复杂的免疫排斥；免疫抑制剂的长期使用有无诱发颈部癌肿复发的可能，仍无明确的答案。诸多因素制约了喉移植研究的进展。喉移植术后移植喉并非处于无菌环境中，容易受到咽部及气管两处来源的感染，移植后大剂量免疫抑制剂的使用又降低了宿主的抗感染能力；同时喉与皮肤及咽部间组织较少，使感染机率增加，较肺、心、肾等移植感染不易控制，所以控制感染是保证喉移植存活的关键；另外同种异体喉植入受体后，如何早期鉴别移植物是否成活是困扰喉移植研究的难题。本实验通过动物颈部解剖观察选定合适的喉移植动物模型，建立分期喉移植模式，并进行移植喉体的组织学观察和免疫因子检测，试图摸索成功的喉移植模型并寻找该模型可靠的免疫排斥检测指标。
方法：1.对6只比格犬、6只Wista大鼠、4只家猫分别进行颈部解剖，观察测量喉部供应血管，选择最适合喉移植的动物模型。2.选定比格犬为喉移植动物模型，选择体重10～15kg的比格犬两两配对进行喉移植，先将供体喉与受体犬颈部血管重建血运后埋藏于受体犬颈部组织中，不与咽气管腔相通，使感染源最少，建立Ⅰ期喉移植模型；将比格犬分组为同种异体喉移植加环孢素组(A组，11只)，同种异体喉移植不加环孢素组(B组，6只)，自体喉再造组(C组，4只)，定期取供喉标本进行组织学检测粘膜、血管内皮、神经、软骨的变化。3.定期采集受体犬静脉血，进行IL2、TNFa免疫因子的检测。4.定期进行T细胞分型CD4+T、CD8+T检测，计算CD4/CD8比值。
结果：1.比格犬喉部血液供应来自颈总动脉发出的分支-颅甲动脉和喉动脉，单侧颅甲动脉可以满足喉体血流的需要；喉部静脉回流至舌骨静脉弓，再回流至颈外静脉；吻合带有颅甲动脉的颈总动脉和舌骨静脉弓的颈外静脉，可以保证移植喉体的血流供应。2.喉移植后的主要组织学变化是粘膜上皮的改变。A组在移植后的组织学改变为轻中度免疫排斥，在3～5天时出现，粘膜上皮细胞以区域性脱失、形成小溃疡为主，早期神经、软骨无明显异常，2周以上的变化不明显；B组表现为中重度免疫排斥反应移植后粘膜上皮细胞逐渐坏死、上皮脱失，固有膜腺体萎陷、坏死，神经脱髓鞘，软骨核固缩、碎裂，2周以上喉体外形丧失，组织溶解；C组无免疫排斥出现。电镜下超微结构改变以粘膜空泡变性为主，线粒体空泡变性明显，并明显早于光镜下改变。3.移植后IL2、TNFa免疫因子三组中均升高，A、C组IL2、TNFa分别在移植后第一天、第三天达峰值，随后逐渐降低，B组移植后一直升高；IL2较TNFa改变出现早。T细胞分型中CD4+T和CD8+T移植后变化不一，CD4+T呈升高、CD8+T呈下降趋势，CD4/CD8比值在A组中先升高后降低，约至10天时恢复到移植前水平，B组中CD4/CD8比值随时间而增加，C移植前后变化不明显。
结论：1.比格犬是适合进行喉移植的动物模型；分期喉移植模式切实可行；移植后的3～5天是危险期，移植后的免疫抑制剂剂量应根据体重随时调整；Ⅰ期移植后7～10天可以进行Ⅱ期喉再造。2.使用免疫抑制剂可以有效改善宿主抗移植物免疫排斥反应。3.IL2、TNFa、CD4/CD8可以早期反映机体的免疫排斥状态，是同种异体喉移植可靠的免疫检测指标。