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目的：1.应用超顺磁性免疫磁珠代替传统胶体金标记的免疫层析技术，建立一种快速、准确、灵敏的性激素（促黄体生成素、雌三醇）检测方法;2.分别对超顺磁性免疫层析检测促黄体生成素(LH)、雌三醇(E3)方法的实验条件及实验流程进行优化;3.对所建方法进行临床应用性能评价。 方法：1.采用NHS/EDC修饰磁珠，以1株LH抗体（β-LH抗体）与磁珠偶联，另1株LH抗体（α-LH抗体）包被于硝酸纤维素膜，建立双抗体夹心法与免疫层析相结合的定量检测方法。从NC膜上α-LH抗体的浓度、磁珠偶联的β-LH抗体的浓度、加入Tween-20的浓度、检测时间四个方面对实验中浓度及条件进行优化。在最佳的实验条件下，通过线性范围、精密度、准确度、特异性、稳定性等方面对所建方法进行性能评价。收集常规检测LH可信度较高的化学发光法(CLIA)检测后标本，再用所建方法重复检测，验证方法的可靠性。2.采用NHS/EDC修饰磁珠，以E3单克隆抗体与磁珠偶联，E3偶联BSA（E3-BSA）包被于硝酸纤维素膜，建立免疫竞争法与免疫层析相结合的定量检测方法。从NC膜上E3-BSA抗原的浓度、磁珠偶联的E3抗体的浓度方面对实验中浓度及条件进行优化。在最佳的实验条件下，从线性范围、精密度、准确度、特异性、稳定性等方面对所建方法进行性能评价。收集临床上常规检测E3可信度较高的时间分辨荧光免疫层析检测后标本，再用所建方法重复检测，验证方法的可靠性。 结果：1.喷在T线上的最佳α-LH抗体的浓度是5mg/ml，与磁珠偶联的抗体最佳量为520μg，体系中加入Tween-20的最佳浓度为1％，磁珠偶联LH抗体与LH结合后与硝酸纤维素膜包被LH抗体反应磁信号检测最佳时间为20min;所建方法低值、中值、高值变异系数(CV)均＜15％，偏倚＜10％，回收率为90％～120％，灵敏度为0.63U/L，与人绒毛膜促性腺激素(HCG)、促甲状腺激素(TSH)、促卵泡激素(FSH)无明显交叉反应，与CLIA比对检测结果，相关性良好（R2=0.962，P＜0.05）。2.E3-BSA的最佳浓度为3mg/ml，与磁珠偶联的E3抗体最佳量为30μg;所建方法低值、中值、高值变异系数(CV)为5％～13％;偏倚＜10％;回收率为90％～110％，与雌二醇(E2)、孕酮无明显交叉反应，临床血清检测结果相关性良好(R2=0.946，P＜0.05)。 结论：超顺磁性免疫层析检测人血清中LH、E3的方法简便、快速、准确，灵敏度高且成本低，与常规检测方法对比，相关性良好，有望成为即时检验(POCT)方法定量检测生物样品中微量成分发展的方向。