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研究目的与意义: 作为主要的细胞治疗方法，间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell，MSC)可以用于骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、韧带、血管、心脏、肝脏、肾脏、胰腺、膀胱和大脑等器官的再生、体成分的增强、运动水平的提高、运动性疲劳的抵抗和运动损伤的治疗。因此，研究MSC的增殖条件对促进体内或移植的MSC的增殖具有重要意义。本研究揭示持续高糖和间歇性高糖对C3H10T1/2小鼠间充质干细胞增殖活性的影响。 研究方法: 选取生长状态良好的C3H10T1/2小鼠MSC，以1000个/孔种入含有10％胎牛血清的96孔板:1）分别用5 mmol/L和22.5 mmol/L葡萄糖预处理48 h后，计时0h，换不同浓度葡萄糖（5、22.5、30/50、100、150、200、300、500和800 mmol/L）持续培养细胞，噻唑蓝(3-(4，5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3，5-di-phenytetrazoliumromide，MTT)法检测细胞增殖活性:2）细胞经22.5 mmol/L葡萄糖预处理48 h后，采用高糖(30/50、100、150 mmol/L)和正糖(22.5 mmol/L)12h交替培养，MTT法检测细胞增殖活性。 研究结果: (1)无论是5 mmol/L葡萄糖预处理还是22.5 mmol/L葡萄糖预处理后，用不同浓度的葡萄糖长期在10％胎牛血清中培养C3H10T1/2时，22.5 mmol/L葡萄糖组细胞的增殖活性最佳。 (2)经22.5 mmol/L葡萄糖预处理后换不同葡萄糖浓度培养细胞后，和22.5mmol/L葡萄糖处理组相比，高糖50、100、300 mmol/L具有显著促增殖作用，但持续时间随糖浓度的升高而缩短，在96 h后所有高糖组促增殖作用均消失，转为抑制增殖。5 mmol/L葡萄糖预处理也呈现相似的结果，但高糖促增殖所需要的糖浓度更高，促增殖作用维持的时间更短，仅在24 h内促增殖。 (3)正糖预处理组的前96 h和低糖预处理组的前24 h，高糖促进C3H10T1/2细胞增殖在某些糖浓度范围内呈台阶式增长。 (4)30、100、150 mmol/L高糖和正糖交替培养同样具有短暂促增殖作用。 (5)正糖预处理48 h的实验中，较之隔天更换培养基的实验，12小时换液的实验中相同浓度高糖促进细胞增殖的时间较短，相同培养时间的细胞增殖活性较小。 研究结论: (1) C3H10T1/2细胞在10％胎牛血清中培养的正糖浓度为22.5 mmol/L，是细胞生长的最佳葡萄糖浓度。 (2)在10％胎牛血清中，持续性高糖和间歇性高糖具有短暂促进C3H10T1/2细胞正糖增殖的作用。 (3)长时间(96h)高糖培养可能会对细胞产生糖毒性，抑制细胞增殖。 (4)频繁(12h)更换培养基可能会对细胞造成损伤，抑制细胞增殖。