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目的:当前研究认为脓毒症发病早期存在炎症反应紊乱和凝血功能紊乱,而针对这两个病理环节的治疗显得十分重要,能改善预后,如活化蛋白C的研究,显示出了良好效果。以往的研究也表明活血化瘀药物的治疗对脓毒症有一定疗效。本题旨在观察活血化瘀药物对脓毒症病理过程中的炎症反应的影响,研究中药芪参活血颗粒对脓毒症大鼠生存时间和生存率的影响,以及探讨其对粘附分子和血清内毒素等指标的水平的影响。
方法:采用盲肠结扎法(CLP)制造脓毒症模型,分两阶段研究,第一阶段观察生存时间的研究分为四组:模型组(CLP),中药治疗组(CLP+造模后1小时开始给药),预防用药组(CLP+造模前1小时开始给药),假手术组(仅开腹一缝合,不做盲肠结扎穿孔)。观察大鼠一般状况和自然死亡时间,观察时间15天。第二阶段观察炎症指标的研究分成五组:模型组,中药治疗组,预防用药组,假手术组方法同上,造模后3h,6h,12h,24h,72h处死动物,另有8只正常大鼠作对照组,采血流式细胞术测CD11b/CD18,改良基质显色法测内毒素水平,肺脏制成匀浆ELISA法测ICAM-1表达。
结果:本实验采用CLP法造成脓毒症模型,研究中药芪参活血颗粒对脓毒症大鼠生存率和生存时间的影响,模型组总死亡率是55.56%,中药组(治疗组和预防组)大鼠的死亡率是27.78%,中药组能够明显降低脓毒症大鼠的死亡率(Logranktest,p<0.05),中药治疗组和中药预防组在15天观察期内的生存时间较模型组延长,虽无统计学差异(秩和检验),但p值很小(0.057,0.050)。模型组大鼠在制模后3h血中性粒细胞表面CD11b的表达即出现明显升高,6h达峰值,之后逐渐下降,在24h内各时间点均明显高于假手术组和正常组(p<0.05),至72h降至接近假手术组的水平(p>0.05)。中药组在24h内各点均低于模型组(其中在3h、6hp<0.05)。而中药治疗组与预防组之间无统计学差异(p>0.05)。假手术组在3h、6h、12h、24h均低于正常组(其中3h p<0.05)。模型组大鼠制模后肺组织ICAM-1表达升高,在3h、6h明显高于假手术组(p<0.05)。两个中药组在24h内低于模型组,但仅在24h时中药预防组明显低于模型组且低于中药治疗组,有统计学差异(p<0.05)。模型组大鼠造模后血浆内毒素水平急剧上升,3h时水平最高,之后逐渐降低,与假手术组比较3h、6h有统计学差异(p<0.05)。中药治疗组3h明显低于模型组(p<0.05),中药预防组在3h,6h,24h均明显低于模型组,峰值出现在6小时左右,且峰值明显低于模型组峰值(p<0.05),也低于6小时模型组的内毒素水平。
结论:本实验采用CLP法制成脓毒症模型,观察芪参活血颗粒对其生存率和生存时间的影响及部分机理的研究,结论如下:
1.中药芪参活血颗粒(治疗组和预防组)可以明显减低脓毒症大鼠死亡率,并有延长生存时间的趋势。而中药预防组和治疗组之间比较无区别。
2.中药芪参活血颗粒可以降低脓毒症发生早期粘附分子血中性粒细胞表面CD11b表达的升高。
3.中药芪参活血颗粒对脓毒症时肺组织ICAM-1有降低趋势。
4.中药芪参活血颗粒能够明显降低脓毒症大鼠血浆内毒素升高的水平。
因此,中药复方芪参活血颗粒能够改善脓毒症大鼠的预后,降低脓毒症时血浆内毒素水平,降低粘附分子的表达,从而能够改善内毒素引起的炎症反应,减轻白细胞粘附引起的内皮和组织的损伤,以及继发的炎症和凝血级联反应,可能为其改善脓毒症预后的机理之一。