1.葫芦素衍生物的制备和生物活性研究;2.南蛇藤根皮的化学成分和生物活性研究

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本论文包括两章,第一章是葫芦素类衍生物的制备及它们的细胞毒性和stat3磷酸化抑制活性研究。以葫芦素B(1)和D(16)为底物,利用不同的氧化剂和还原剂等,综合各种色谱技术纯化反应产物,并借助波谱技术对每个衍生物进行结构鉴定。在所获得的37个葫芦素类衍生物中(Figure1),2-15,17-19主要是在不影响边链的情况下,对A环、16-OH和△5,6进行修饰得到的产物;20-24是保持其他位点不变,对边链进行修饰得到的产物,如消除乙酰氧基、双键移位等;25-33是增加边链上的不饱和度,同时对A环和16-OH进行修饰得到的产物;34-38是在边链完全丢失的情况下,对A环和16-OH进行修饰得到的产物;39是仅有边链的衍生物。对所得的衍生物以及原料葫芦素B和D进行肿瘤细胞毒性和stat3磷酸化抑制活性测试,发现化合物25有明显的stat3抑制活性(8.52μM)且没有明显的细胞毒性(A549:IC5014.84.μM;Bel7402:IC5067.22μM);化合物26细胞毒性明显(A549:IC500.72μM;Bel7402:IC500.19μM)而不具有stat3抑制活性。这一发现提示葫芦素类化合物的细胞毒性和Jak-stat3通道的抑制活性没有必然的相关性,即有细胞毒性的,不一定有stat3抑制活性,反之亦然。同时,通过葫芦素类化合物的细胞毒性测试结果,总结出其肿瘤细胞毒性构效关系:边链上α,β不饱和酮为其关键活性位点,不可缺少,扩大或者减少边链上的不饱和度都会降低它的活性:16-OH为活性位点,羟基被乙酰化或者氧化成羰基都会减弱它的活性;A环上2,3位氧以α/β羟基或者羰基的形式存在对活性影响不大;25位为乙酰氧基和△5,6双键对活性没有影响。   第二章是卫矛科南蛇藤属植物南蛇藤(Celastrus orbiculatus)根皮的化学成分和生物活性研究。综合利用正相硅胶、RP-18反相硅胶、MCI gel CHP20P、Sephadex LH-20、Toyopear HW-40等柱色谱,对南蛇藤根皮乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行系统的分离纯化,通过波谱分析和化学反应等手段共分离鉴定45个化合物,其中新化合物21个(Figure2)。这些化合物结构以萜类为主,包括木栓烷型三萜,齐墩果烷型三萜,乌苏烷型三萜,丢失3个碳的降二萜,以及萜类聚合物。将所得的化合物进行T细胞增殖抑制活性测试,结果表明,从该植物中分离得到的南蛇藤素和南蛇藤素聚合物具有明显的T细胞增殖抑制活性,提示这些化合物可能是该植物治疗类风湿性关节炎的物质基础。同时对南蛇藤素在酸性条件下的重排机制进行了探讨,推测其在酸性条件下容易发生变化是从该植物中分离得到较多南蛇藤素结构类似物的原因。
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