【摘 要】
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巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是一种重要的热带经济林木,其胶乳是目前工业用天然橡胶的唯一来源,由于具有特殊而重要的用途,在热带地区被广泛种植.提高胶乳产量一直是橡胶
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巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是一种重要的热带经济林木,其胶乳是目前工业用天然橡胶的唯一来源,由于具有特殊而重要的用途,在热带地区被广泛种植.提高胶乳产量一直是橡胶栽培及生产的主要目标.该研究从分子水平入手,克隆橡胶树的乙烯受体基因(etrl),并在转录水平和蛋白质翻译水平上研究etrl基因在乳管细胞中的表达及与乙烯刺激的关系,取得了以下结果:1.通过对GenBank登录的已克隆的植物etrl基因序列进行核苷酸同源性分析, 设计特异引物.以胶乳总RNA为模板,反转录成cDNA第一链,又以cDNA第 一链为模板进行PCR扩增,得到特异扩增片段.2.把扩增得到的特异片段连接到pGEM-T Easy载体上,用Cohn法转化大肠杆菌 DH5α,经过筛选、鉴定,得到阳性克隆子.3.从阳性克隆子中提取克隆片段,经序列测定分析,结果表明,克隆片段的cDNA大小为816bp,编码的蛋白质包含272个氨基酸.4.从橡胶树PR107品系的嫩叶提取基因组DNA,用限制性内切酶EcoRⅠ、HindⅡ分别酶切,琼脂糖凝胶电泳分离并转膜后,用克隆的橡胶树etrl基因的cDNA片段作探针进行Southern杂交分析.5.用橡胶树PR107、RRIM600、GT1个品系的基因组DNA分别经HjndⅢ酶切后,进行了Southern杂交.7.从乙烯处理的橡胶树植株和对照植株胶乳中提取蛋白质,进行SDS-PAGE.
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