论文部分内容阅读
经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)术后血管重塑(VR)所致的再狭窄是影响冠心病介入治疗预后的关键问题，近期传统的平滑肌学说受到了挑战，有新的证据表明，血管外膜可能参与了再狭窄的形成，外膜成纤维细胞活化并向血管内膜迁移是导致新生内膜增厚、管腔狭窄的重要原因之一。针对现存的发病机制不清楚和疗效不满意等问题。拟从中医整体辨证的思路出发开展此项研究，为再狭窄的预防和治疗提供新的思路。
目的：
1.建立大鼠颈总动脉内膜球囊损伤模型，动态观察血管重塑的变化。
2.动态观察大鼠颈总动脉内膜球囊损伤模型的血管壁特别是外膜细胞活化特性。
3.建立腺病毒转染大鼠颈总动脉外膜+球囊损伤模型，观察外膜细胞迁移特性。
4.研究益气活血解毒方对大鼠颈总动脉内膜球囊损伤后血管重塑的药理作用。
方法：
1.大鼠72只，行左侧颈总动脉内膜球囊剥脱术，分别于损伤后3天(day，d)、7d、14d、28d，取双侧颈总动脉，常规病理切片并行HE染色，进行病理形态学学观察。
2.应用免疫组化方法检测损伤后各时间点血管壁各层α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量的变化。
3.采用Ad5F35型腺病毒转染大鼠左侧颈总动脉外膜，并于转染后4d后行球囊损伤术，于损伤后7d，取双侧颈总动脉并进行X-gal染色，观察损伤后外膜细胞的迁移特性。
4.选用大鼠50只，随机分为假手术组、模型组、西药组(阿司匹林+普伐他汀+卡托普利)、血府逐瘀组(阿司匹林+普伐他汀+血府逐瘀胶囊)和益气活血解毒组(阿司匹林+普伐他汀+益气活血解毒口服液)，灌服药物28d后，常规病理取材，采用HE染色，观察血管病理形态学改变；采用免疫组化技术，检测血管壁各层α-SMA表达量的变化；采用Masson染色，观察血管壁胶原表达量的变化。另选大鼠50只，随机分为5组(与28d相同)，灌服药物7d后，常规病理取材，采用免疫组化技术，检测血管壁各层α-SMA的表达量。
结果：
1.在大鼠颈总动脉内膜球囊损伤模型的早期(3～7d)，内膜增生不明显，而外膜的厚度和面积显著增加；相反，损伤后期(14～28d)，内膜厚度和面积增生明显，管腔面积持续减小，而外膜则回落到基线水平。
2.假手术组中膜α-SMA染色呈阳性，内膜和外膜呈阴性。在中膜，损伤后3dα-SMA阳性表达显著减少并呈花斑样缺失，7～28d逐渐恢复。在新生内膜，损伤后7dα-SMA阳性表达，并逐渐增加。在外膜，损伤后7dα-SMA呈阳性表达，14d减少，28d呈阴性。
3.损伤后7d，未做病毒转染的假手术动物，血管壁全层未见细胞核着色；经腺病毒转染但未行球囊损伤的动物，腺病毒转染阳性细胞(细胞核蓝染)只限于血管外膜。经腺病毒转染又行球囊损伤的动物，细胞核蓝染的细胞主要集中在中膜，外膜和内膜只是少量细胞核蓝染，说明被转染的血管外膜向中膜迁移和内膜迁移。
4.用药后28d，益气活血解毒组、血府逐瘀组和西药组对新生内膜厚度和面积均有不同程度的抑制作用。益气活血解毒组、血府逐瘀组明显抑制血管壁厚度和面积，以及血管狭窄率，从而有良好地抑制血管重塑的疗效。西药组疗效稍差。同时三个药物组均可减少新生内膜α-SMA阳性细胞面积和单位面积内胶原含量。血府逐瘀组减少内膜增生疗效更突出，益气活血解毒组降低血管局部的胶原含量和抑制新生内膜α-SMA的效果为优。两组之间无明显差异。三个药物组对用药后7d血管各层α-SMA阳性细胞面积均无明显影响。
结论：
1.采用球囊导管损伤大鼠颈总动脉内膜的模型，初步模拟PTCA后血管重塑的基本病理过程，该模型的早期改变以外膜增生的血管外向重塑为主，后期以新生内膜增生的内向重塑为主。
2.血管外膜细胞的早期活化可能是血管外膜增厚的主要原因。血管外膜的活化和迁移很有可能在血管重塑中起重要作用。
3.中西药联合治疗方案对于防治球囊损伤后血管重塑尤其是新生内膜增生优于西药单独治疗。由于中药治则治法用药不同，其作用靶点各有侧重。益气活血解毒口服液通过抑制新生内膜α-SMA的活化，减少血管壁胶原的含量，抑制内膜增生和血管狭窄率，从而起到抑制血管重塑的作用。